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日期:2021-11-02瀏覽:874次
1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
磷酸化有絲分裂激酶B抗體
肌動蛋白相關(guān)蛋白M1抗體
ALKB蛋白抗體
乙酰輔酶A?;D(zhuǎn)移酶1抗體
磷酸化β-肌動蛋白抗體
磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR 抗體
磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體
載脂蛋白D抗體
酸敏感離子通道1抗體
雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(C端)
髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體
腺苷酸環(huán)化酶1抗體
腺瘤樣息肉抗體
溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶抗體
錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體
磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體
?;o酶A脫氫酶很長鏈抗體
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體
錨蛋白重復(fù)序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體
有絲分裂激酶B抗體
磷酸化Ack1抗體
磷酸化Ack1抗體
磷酸化β抑制蛋白1抗體
磷酸化有絲分裂激酶A抗體
磷酸化APS抗體
有絲分裂激酶A抗體
干擾素誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體
水通道蛋白-2抗體
腫瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶結(jié)合蛋白抗體
ADP核糖基化因子樣11抗體
ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX3抗體
ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體
ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX2抗體
自噬相關(guān)蛋白10抗體