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日期:2022-05-19瀏覽:1004次
1、取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。
2、分組:取出96孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。10個標(biāo)準(zhǔn)孔,1個空白對照
3、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:準(zhǔn)備小試管6只,依次編好號碼,先在各小試管中加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ul,然后取原濃度標(biāo)準(zhǔn)品100ul 加入一只已編好號的試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第三只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第四只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第五只試管中,充分混勻;然后在該試管中取100ul,棄掉。第六只試管作為0 號標(biāo)準(zhǔn)品。
4、加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入50ul的蒸餾水;其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標(biāo)記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
5、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
6、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
7、加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
8、溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時。
9、洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15-30s,充分清洗酶標(biāo)板5次,用吸水紙*拍干。
10、顯色:各孔加入顯色劑A液50ul后,再加入顯色劑B液50ul。
11、終止:25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘,加入50ul終止液。
12、讀板:在450nm波長讀取各孔的OD值。
注:讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,讀板時間控制在終止反應(yīng)后的30分鐘內(nèi),以免影響準(zhǔn)確性。
Kelch樣蛋白8抗體
鉀離子通道蛋白家族KCNQ2抗體
鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體
鉀通道蛋白1抗體
電壓門控鉀通道蛋白1抗體
微管驅(qū)動蛋白家族成員1A抗體
鉀離子通道蛋白家族成員1抗體
鉀離子通道蛋白家族成員1樣蛋白抗體
鉀離子通道蛋白家族成員2抗體
G蛋白激活內(nèi)向鉀通道5抗體
鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體
抑癌蛋白EZH2抗體
DNA修復(fù)酶Ku70抗體
DNA修復(fù)酶Ku-80抗體
14號染色體開放閱讀框106抗體
腦蛋白9抗體
鉀通道相互作用蛋白2抗體
劍蛋白p60亞基A1抗體
Kazrin蛋白抗體
鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體
磷酸化Ras信號轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體
激肽釋放酶7抗體