服務熱線
021-59989018
歡迎訪問上海研生實業(yè)有限公司網(wǎng)站
日期:2022-07-14瀏覽:616次
人蛋白 DJ-1ELISA試劑盒試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值i大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
類人猿免疫球蛋白G4(IgG4)ELISA檢測試劑盒Simian Immunoglobulin G4,IgG4 ELISA Kit
類人猿巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA檢測試劑盒Simian Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA Kit
類人猿降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA檢測試劑盒Simian calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA Kit
類人猿降鈣素(CT)ELISA檢測試劑盒Simian Calcitonin,CT ELISA Kit
類人猿黃體生成素(LH)ELISA檢測試劑盒Simian Luteinizing Hormone,LH ELISA Kit
類人猿骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA檢測試劑盒Simian Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA Kit
蝌蚪睪酮(T)ELISA檢測試劑盒Tadpole Testosterone,T ELISA kit
蝌蚪雌二醇(E2)ELISA檢測試劑盒Tadpole Estradiol,E2 ELISA kit
蝌蚪γ氨基丁酸(GABA)ELISA檢測試劑盒Tadpole Gamma-Aminobutyric Acid,GABA ELISA Kit
上一篇:IL-6 雞白介素6酶聯(lián)免疫試劑盒注意事項
下一篇:淋巴瘤細胞注意事項