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日期:2022-09-01瀏覽:627次
1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。
1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
干4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)重組蛋白
過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)重組蛋白
含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5(FNDC5)重組蛋白
含RNA結(jié)合冷休克域蛋白E1(CSDE1)重組蛋白
含動力蛋白重鏈域蛋白1(DNHD1)重組蛋白
含卷曲螺旋域蛋白3(CCDC3)重組蛋白
含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)重組蛋白
核糖核酸酶A10(RNASE10)重組蛋白
核糖核酸酶A12(RNASE12)重組蛋白
核糖體蛋白L23A(RPL23A)重組蛋白
核糖體蛋白S6激酶β1(RPS6Kβ1)重組蛋白
核因子κB受體激活因子配基(RANκL)重組蛋白
黑色素瘤關(guān)聯(lián)硫酸軟骨素蛋白聚糖(MCSP)重組蛋白
紅細胞補體受體1(CR1)重組蛋白
紅細胞生成素(EPO)重組蛋白
紅細胞生成素受體(EPOR)重組蛋白
花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白
滑行蛋白α(TXLNα)重組蛋白