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更新時(shí)間:2024-11-04
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產(chǎn)品名稱:小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
組織來(lái)源:主動(dòng)脈組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮分離自主動(dòng)脈組織;主動(dòng)脈是體循環(huán)的動(dòng)脈主干。其運(yùn)行路徑為:升主動(dòng)脈起于左心室,至右側(cè)第2胸肋關(guān)節(jié)高度移行為主動(dòng)脈弓,弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動(dòng)脈;在第12胸椎體高度穿膈的主動(dòng)脈裂孔移行為腹主動(dòng)脈,以上為胸主動(dòng)脈,至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動(dòng)脈;髂總動(dòng)脈在骶髂關(guān)節(jié)高度分為髂內(nèi)、外動(dòng)脈。主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是覆蓋在主動(dòng)脈內(nèi)面的單層細(xì)胞,可分泌一系列血管活性物質(zhì)而保持血管穩(wěn)態(tài),當(dāng)其受到炎癥或其它因素刺激后穩(wěn)態(tài)被破壞而導(dǎo)致一些心血管疾病的發(fā)生。因此,主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞已成為研究心血管疾病發(fā)病機(jī)制及治療藥物缺少的工具。內(nèi)皮細(xì)胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專(zhuān)門(mén)上皮細(xì)胞,由一層扁平細(xì)胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng),由心臟直至最小的微血管。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子氧化低密度脂蛋白試劑盒 兔子氧化低密度脂蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子氧化低密度脂蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子氧化低密度脂蛋白試劑盒、兔子氧化低密度脂蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子血小板因子4試劑盒 兔子血小板因子4試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子血小板因子4試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子血小板因子4試劑盒、兔子血小板因子4eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子血小板衍生生長(zhǎng)因子試劑盒 兔子血小板衍生生長(zhǎng)因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子血小板衍生生長(zhǎng)因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子血小板衍生生長(zhǎng)因子試劑盒、兔子血小板衍生生長(zhǎng)因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子血小板活化因子試劑盒 兔子血小板活化因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子血小板活化因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子血小板活化因子試劑盒、兔子血小板活化因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠病毒(MVM)試劑盒 96T/48T
Human squamous cell carcinoma related aigen (SCCAg) ELISA Kit 人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原(SCCAg)試劑盒
HumanCCAAT/enhancerbindingproteindeta,C/EBPδELISAKit 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickenmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/B試劑盒雞主要組織相容性復(fù)合體(MHC/B)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞NFKAPPABP65蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseFreeThyroxine,FT4ELISAKit小鼠游離甲狀腺素(FT4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體
肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活抑制蛋白2抗體
CST3重組人 Cystatin C / CST3 蛋白 Protein
前列腺素I合酶(PTGIS)重組蛋白 Recombinant Prostaglandin I Synthase (PTGIS)
GMFG重組人 GMFG / Glia maturation factor, gamma 蛋白 Protein
FZD5 Protein Human 重組人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白
HA Protein H10N9 重組甲型流感 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
前列腺素I合酶(PTGIS)重組蛋白 Recombinant Prostaglandin I Synthase (PTGIS)
FZD5 Protein Human 重組人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白
CST3重組人 Cystatin C / CST3 蛋白 Protein
HA Protein H10N9 重組甲型流感 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
GMFG重組人 GMFG / Glia maturation factor, gamma 蛋白 Protein
小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠雌激素(E)試劑盒 ,英文名: E ELISA Kit
Mouse collagen type IV (Col IV) ELISA Kit 小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)試劑盒
ELISA 小鼠CXC趨化因子配體16(mouse CXCL16) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLFA-3/CD58ELISAKit大鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3
通用型HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKitET內(nèi)毒素
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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