產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品型號(hào)：

廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商

訪問量：744

更新時(shí)間：2024-11-05

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產(chǎn)品名稱：兔皮脂腺細(xì)胞

組織來源：皮脂腺

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔皮脂腺體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳僀?僀

細(xì)胞簡介：

兔皮脂腺分離自皮脂腺組織；皮脂腺是由腺泡與短的導(dǎo)管構(gòu)成的全漿分泌腺，皮脂腺導(dǎo)管開口于毛囊。除手外的其余部位皮膚中均有皮脂腺，前額、鼻、背上部的皮脂腺多，稱為皮脂溢出部位。其余的部位比較少，掌、足趾及足背沒有皮脂腺。皮脂腺大多位于毛囊及立毛肌之間，由一個(gè)或幾個(gè)囊狀的腺泡與一個(gè)共同的短導(dǎo)管構(gòu)成。分泌部呈囊泡狀，由多層腺細(xì)胞構(gòu)成。腺泡周邊緊貼基膜的細(xì)胞較小，呈扁平或立方形，稱為基細(xì)胞。新生的腺細(xì)胞不斷向中心移動(dòng)，體積增加，胞質(zhì)內(nèi)的小脂滴越來越多，腺泡中心的細(xì)胞更大，細(xì)胞核固縮、細(xì)胞器消失，胞質(zhì)內(nèi)充滿脂滴。后腺細(xì)胞解體并與脂滴同時(shí)排出，即為皮脂。皮脂腺的分泌因人種、年齡、性別及氣候等因素而不同。10歲以前分泌力弱，16～35歲分泌旺盛，老年期減弱；夏天分泌旺盛，秋冬季分泌較少；過食油膩、辛辣刺激的食物以及按摩也可增加分泌。皮脂腺分泌旺盛，可導(dǎo)致皮膚油膩、皮膚粗糙、毛孔粗大，容易發(fā)生粉刺及脂溢性皮炎。皮脂腺，分泌皮脂過少，可導(dǎo)致皮膚干燥、脫屑、皮膚老化等，所以控制皮脂腺的分泌很關(guān)鍵。皮脂腺的活動(dòng)也與多種皮膚疾病相關(guān)，例如: 皮脂腺數(shù)量或其活動(dòng)的減少可能會(huì)導(dǎo)致皮膚干燥綜合征，特應(yīng)性皮炎是皮膚屏障功能障礙的炎癥性疾病，研究發(fā)現(xiàn)其發(fā)病與皮脂腺功能減弱有關(guān) ，毛周角化病的皮損中則沒有皮脂腺。而皮脂分泌過多和尋常痤瘡相關(guān)。同時(shí)現(xiàn)有研究分析結(jié)構(gòu)化數(shù)據(jù)特征， 嘗試探索皮脂腺與皮脂腺腫瘤發(fā)生的聯(lián)系。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔皮脂腺采用聯(lián)合機(jī)械分離制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔皮脂腺經(jīng)CK4免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細(xì)胞如何處理？

1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作

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