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更新時間:2024-11-05
兔腎臟微血管內(nèi)皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腎 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細胞樣 | YS-01X8432 |
細胞簡介:
兔腎臟微血管內(nèi)皮分離自腎臟;腎臟是兔的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水分及其他有用物質,如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調節(jié)水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進行。腎臟內(nèi)部的結構,可分為腎實質和腎盂兩部分。在腎縱切面可以看到,腎實質分內(nèi)外兩層:外層為皮質,內(nèi)層為髓質。腎皮質位于腎實質表層,富含血管,新鮮時呈紅褐色,由一百多萬個腎單位組成。每個腎單位由腎小體和腎小管所構成,部分皮質伸展至髓質錐體間,成為腎柱。腎髓質位于腎皮質的深面,血管較少,色淡紅,為10-20個錐體所構成。腎錐體在切面上呈三角形。錐體底部向腎凸面,向腎門,錐體主要組織為集合管,錐體稱腎乳頭,每一個乳頭有10-20個乳頭管,向腎小盞漏斗部開口。在腎竇內(nèi)有腎小盞,為漏斗形的膜狀小管,圍繞腎乳頭。腎錐體與腎小盞相連接。每腎有7-8個腎小盞,相鄰2-3個腎小盞合成一個腎大盞。每腎有2-3個腎大盞,腎大盞匯合成扁漏斗狀的腎盂。腎盂出腎門后逐漸縮窄變細,移行為輸尿管。腎單位是腎臟結構和功能的基本單位。腎小體包括腎小球和腎小囊。腎小體內(nèi)有一個毛細血管團,稱為腎小球,腎小球是個血管球。它由腎動脈分支形成。腎小球外有腎小囊包繞。腎小囊分兩層,兩層之間有囊腔與腎小管的管腔相通。腎小管匯成集合管。若干集合管匯合成乳頭管,尿液由此流入腎小盞。微血管又稱毛細血管。分布于各種組織和細胞間的微細的血管。介于微動脈和微靜脈之間。平均直徑7-9微米,數(shù)量極多,成網(wǎng)狀分布。管壁由一層內(nèi)皮細胞及一薄層基膜組成,厚約0.5微米?;ね饷嬗斜咏Y締組織,其中有纖維細胞、巨噬細胞和周細胞等。細的毛細血管由一個內(nèi)皮細胞圍成管腔,較粗的毛細血管由2-3個內(nèi)皮細胞圍成。分布于肌肉組織、神經(jīng)組織和結締組織中的毛細血管,內(nèi)皮細胞間為縫隙連接(縫隙寬150埃),稱連續(xù)毛細血管;分布于內(nèi)分泌腺、腎臟等處的毛細血管,除有縫隙連接外,細胞本身有許多小孔,(孔徑800-1000埃),稱有孔毛細血管;分布于肝、脾、骨髓及某些內(nèi)分泌腺的毛細血管,管腔擴大,稱血竇。毛細血管的管壁薄、通透性大、管徑細(8-10微米)、數(shù)量多、血流速度慢,這些特點使其成為血液與組織液進行物質交換的場所,又稱交換血管。血竇(sinusoid)由毛細血管管腔擴大而成,竇壁的一般結構與毛細血管壁相同,由單層內(nèi)皮細胞構成,內(nèi)皮細胞膜上有窗孔。不同器官的竇壁結構各有差別。脾血竇的內(nèi)皮細胞間有較寬裂隙;肝血竇內(nèi)皮細胞是不連續(xù)的,有較寬的細胞隙(0.1-0.5微米);肝、脾血竇的基膜不完整或無基膜,通透性比毛細血管大,較大的蛋白質和血細胞可以通過。肝血竇壁內(nèi)有枯否細胞,脾血竇內(nèi)外有巨噬細胞,這兩種細胞都有吞噬能力,可吞噬清除血液中的異物、細菌等有害物質,是機體單核巨噬細胞系統(tǒng)的重要組成分。某些內(nèi)分泌腺的血竇有連續(xù)的基膜。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的兔腎臟微血管內(nèi)皮采用膠原酶消化,結合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔腎臟微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):內(nèi)皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔腎臟微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素10(IL-10)試劑盒
小鼠白介素1(IL-1)試劑盒
小鼠八聚體結合轉錄因子4(OCT4)試劑盒
小鼠基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)試劑盒
蛛毒素受體2抗體
艾滋病病毒制約錨定蛋白抗體
BCHE重組小鼠 BCHE / Butyrylcholinesterase 蛋白 Protein
Beta-casein( Beta-casein 0.5mgBeta-casein( Beta-casein) β-酪蛋白(抗原)
APOM重組人 APOM 蛋白 (Fc 標簽) Protein
EREG Protein Human 重組人 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)
DDR1 Protein Rat 重組大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白
Beta-casein( Beta-casein 0.5mgBeta-casein( Beta-casein) β-酪蛋白(抗原)
EREG Protein Human 重組人 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)
BCHE重組小鼠 BCHE / Butyrylcholinesterase 蛋白 Protein
DDR1 Protein Rat 重組大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白
APOM重組人 APOM 蛋白 (Fc 標簽) Protein
小鼠A(CsA)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat phosphorylated exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 大鼠0酸化細胞外信號調節(jié)激酶(pERK)試劑盒
humanprolactin,PRLELISAKit 人催乳素(PRL)pcr檢測試劑盒分裝
Humanai-myelinaibodyIgA,AMAIgA試劑盒人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物同還原酶(aldo-ketoreductase)總活性比色法定量試劑盒20次
Humanuridinedipho-sphateglucuronosylansferase2familypolypeptideB4,UGT2B4ELISAKit人二0酸尿核苷葡糖酸基轉移酶2家族肽B4(UGT2B4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔腎臟微血管內(nèi)皮細胞大鼠腎酶(RNLS)試劑盒 ,英文名: RNLS ELISA Kit
Mouse iercellular adhesion molecule 2 (ICAM-2/CD102) ELISA Kit 小鼠細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒
Ratcoicoopieleasinghormone,CRHELISAKit 大鼠促腎上皮質激素釋放激素(CRH)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforHBsAg乙型肝表面抗原
細胞β-內(nèi)酰胺酶報告基因活性生物發(fā)光法定量試劑盒20次
SheepIerleukin-2receptor,IL-2RELISAKit綿羊白介素2受體(IL-2R)試劑盒規(guī)格:96T/48T