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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
小鼠腎成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
小鼠腎成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：28S核糖體蛋白S33抗體 鋅指蛋白681抗體 抑癌基因5抗體 小鼠腎小球系膜細(xì)胞 大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 ID8-LUC-GFP-Puro 小鼠卵巢上皮癌細(xì)胞-綠色熒光蛋白-熒光素酶標(biāo)記 人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞+luc;U937-LUC-PURO
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問(wèn)量：1005
更新時(shí)間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠腎成纖維細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腎組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7257 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠腎成纖維分離自腎組織；腎臟是機(jī)體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進(jìn)行。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損以及骨創(chuàng)傷的修復(fù)有著十分重要的作用。腎成纖維細(xì)胞是腎臟結(jié)締組織中最重要的細(xì)胞類型，在體外培養(yǎng)中，一般大致成梭形、多角形或不規(guī)則形等，為貼壁生長(zhǎng)型細(xì)胞。剛分離的腎成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。其主要功能有：①組成過(guò)濾屏障內(nèi)壁的重要部分；②在炎癥和致血栓物質(zhì)的刺激合成必要的生物活性分子；③受損后影響系膜細(xì)胞和上皮細(xì)胞，進(jìn)而影響腎臟病變。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)試劑盒 96T/48T
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)試劑盒 96T/48T
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)試劑盒 96T/48T
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE）試劑盒 96T/48T
小鼠腺病毒(ADV)試劑盒 96T/48T
Rat Leptospira IgG (Lebtospira) ELISA Kit 大鼠鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒
Humanisociatedehydrogenase,ICDELISAKit 人異檸檬酸脫輕酶(ICD)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenEpidermalgrowthfactor,EGF試劑盒雞表皮生長(zhǎng)因子(EGF)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞CASPASE-3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MousehepatitisBviruseaigen,HBeAgELISAKit小鼠乙型肝e抗原(HBeAg)試劑盒規(guī)格：96T/48T
RNA（9）甲基轉(zhuǎn)移酶結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體
LRP1B小鼠單克隆抗體
HA重組甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
SCN9A/NAV1.7(Sodium channel protein type 9 subunit alpha 0.5mgSCN9A/NAV1.7(Sodium channel protein type 9 subunit alpha) 電壓開(kāi)啟的離子通道SCN9A抗原
GCK重組人 Glucokinase / GCK 蛋白 Protein
CD8B Protein Human 重組人 CD8B / P37 / LEU2 蛋白
IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / DER4 蛋白
SCN9A/NAV1.7(Sodium channel protein type 9 subunit alpha 0.5mgSCN9A/NAV1.7(Sodium channel protein type 9 subunit alpha) 電壓開(kāi)啟的離子通道SCN9A抗原
CD8B Protein Human 重組人 CD8B / P37 / LEU2 蛋白
HA重組甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / DER4 蛋白
GCK重組人 Glucokinase / GCK 蛋白 Protein
小鼠腎成纖維細(xì)胞大鼠泛素連接酶(E3/UBPL)試劑盒 ，英文名： E3/UBPL ELISA Kit
Pig phosphorylation of exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 豬0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒
羊特定基因序列(Ovine)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
CLIAKitforMAdCAM-1(Humanmucosaladdressincelladhesionmolecule-1)ELISAKit人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子
體液乙酰酯酶活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitVTG鯉魚卵黃蛋白原
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
