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產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-11-05
人牙齦上皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
牙齦 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X8309 |
細(xì)胞簡介:
人牙齦上皮分離自牙齦組織;牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織,呈粉紅色、有光澤、質(zhì)堅韌。牙齦邊緣稱為齦緣,正常呈月芽形。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突。也叫齒齦,通稱牙床;是指包住齒頸的黏膜組織,粉紅色,內(nèi)有很多血管和神經(jīng)。牙齦上皮長期被認(rèn)為是抵御口腔中持續(xù)存在的細(xì)菌的被動免疫屏障,隨著對牙周致病菌的不斷認(rèn)識,發(fā)現(xiàn)牙齦上皮不僅僅是抵御微生物的物理屏障,上皮細(xì)胞還可以分泌抗菌多肽,參與先天性免疫。牙齦上皮作為牙周組織的道屏障,在抵御牙周炎細(xì)菌入侵的過程中發(fā)揮了重要作用,建立正常牙齦上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)體系,將為各種牙齦上皮相關(guān)的研究提供穩(wěn)定的實驗?zāi)P汀?/span>
方法簡介:
實驗室分離的人牙齦上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的人牙齦上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
人牙齦上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)ELISAKit ELISA.
豬白介素17(IL-17)ELISAKit ELISA.
豬髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISAKit ELISA.
豬生長激素釋放多肽(GHRP)ELISAKit ELISA.
豬免疫球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒
Human connexin (Cx) ELISA Kit 人間隙連接蛋白(Cx)試劑盒
PorcineprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit 豬Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAMBP(Humanalpha-1-microglobulin/bikuninprecursor)ELISAKit人α1微球蛋白/bikunin前體
血液胱(cystine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
Porcineadiponectin,ADPELISAKit豬脂聯(lián)素(ADP)試劑盒
NK細(xì)胞受體2D(CD314)抗體
碳酸酐酶1抗體
CD200R4重組小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白 Protein
Cardiac Troponin T 心肌特異性肌鈣蛋白T 0.5mgCardiac Troponin T 心肌特異性肌鈣蛋白T
ADCYAP1R1重組人 ADCYAP1R1 蛋白 Protein
APP Protein Human 重組人 Beta-amyloid 42 / Beta-APP42 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
PROM1 Protein Rat 重組大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
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APP Protein Human 重組人 Beta-amyloid 42 / Beta-APP42 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
CD200R4重組小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白 Protein
PROM1 Protein Rat 重組大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ADCYAP1R1重組人 ADCYAP1R1 蛋白 Protein
人牙齦上皮細(xì)胞大鼠γ基(GABA)試劑盒 ,英文名: GABA ELISA Kit
Rabbit soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒
ELISA 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-3(mouse MMP-3) 進口分裝
CLIAKitforIL-16(MouseIerleukin16)ELISAKit小鼠白介素16
通用型亮(leucine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
VWF大鼠血管性血友病因子/瑞斯托輔因子
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進行
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