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更新時間:2024-11-05
大鼠羊膜間充質(zhì)干細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
羊膜 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8273 |
細胞簡介:
大鼠羊膜間充質(zhì)干分離自胎盤羊膜組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的最內(nèi)層,與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似,含有眼表上皮細胞,包括結(jié)膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質(zhì),其光滑,無血管、神經(jīng)及淋巴,具有一定的彈性;在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層,羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元,主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質(zhì)細胞組成,均具有多分化潛能,可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元,且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠羊膜間充質(zhì)干采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的大鼠羊膜間充質(zhì)經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠羊膜間充質(zhì)干體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子促甲狀腺素試劑盒 兔子促甲狀腺素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子促甲狀腺素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子促甲狀腺素試劑盒、兔子促甲狀腺素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔子促黃體激素試劑盒 兔子促黃體激素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子促黃體激素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子促黃體激素試劑盒、兔子促黃體激素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
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兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒、兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA 試劑盒
Rat neuropeptide Y (NP-Y) ELISA Kit 大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)試劑盒
Humaarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit 人抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)試劑盒 進口分裝
HumanCaspase3,Casp-3試劑盒人胱天蛋白酶3(Casp-3)試劑盒
轉(zhuǎn)基因棉花MON88913品系試劑盒20次
humansinglesandedDNAAibody,ssDNAELISAKit人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)試劑盒
DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體
強直性肌營養(yǎng)不良相關(guān)蛋白9抗體
CLEC5A重組食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 蛋白 Protein
IL-4(Interleukin-4 0.5mgIL-4(Interleukin-4)human peptide 白介素4抗原
FAM45A重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白 Protein
GNAZ Protein Human 重組人 PFK1 / PFKM 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
CPB2 Protein Mouse 重組小鼠 Carboxypeptidase B2 / CPB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IL-4(Interleukin-4 0.5mgIL-4(Interleukin-4)human peptide 白介素4抗原
GNAZ Protein Human 重組人 PFK1 / PFKM 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
CLEC5A重組食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 蛋白 Protein
CPB2 Protein Mouse 重組小鼠 Carboxypeptidase B2 / CPB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FAM45A重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白 Protein
大鼠羊膜間充質(zhì)干細胞大鼠白介素2(IL-2)試劑盒 ,英文名: IL-2 ELISA Kit
Mouse bladder tumor aigen (BTA) ELISA Kit 小鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)試劑盒
ELISA 小鼠白介素-3(mouse IL-3) 進口分裝
CLIAKitforIL-6ELISAKIT大鼠白介素6
通用型雞敗血支原體(Mycoplasma;MG)試劑盒20次
ELISAKitIAA大鼠胰島素自身抗體