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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:926
更新時間:2024-11-07
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:小鼠尾動脈內(nèi)皮細(xì)胞
組織來源:尾動脈
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠尾動脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介:
小鼠尾動脈內(nèi)皮分離自尾動脈組織;尾動脈是鼠尾的主要血管,尾部主要大血管分布表淺,尾側(cè)靜脈適于注射給藥,尾正中動脈適于動脈采血、練習(xí)顯微外科血管吻合技術(shù)等,實(shí)際應(yīng)用相當(dāng)普遍。許多動物模型也使用鼠尾。鼠尾部血管豐富,供血來源于薦中動脈和臀上動脈兩個動脈,形成尾椎節(jié)段性分布和縱向貫通分布相結(jié)合的特點(diǎn),尾部淺層 3 套縱向動靜脈系統(tǒng),鼠尾背側(cè)為不規(guī)則動靜脈鏈狀結(jié)構(gòu),深層血管與淺層血管雙層籠狀以每節(jié)脊椎為單位溝通,且呈動靜脈血管徑不匹配的特點(diǎn)。通過研究發(fā)現(xiàn)鼠尾存在兩套血源: 薦中動脈和臀上動脈。其在尾部依尾橫動脈形成溝通。尾橫動脈呈尾椎節(jié)段性分布,直接溝通尾正中動脈、尾深動脈和皮支。在尾部被橫斷后,可以保持損傷節(jié)段以上尾椎的動靜脈回流通路; 鼠尾存在動靜脈口徑明顯不規(guī)范的現(xiàn)象: 尾外側(cè)靜脈明顯大于伴隨的動脈,而正中動脈明顯大于伴隨的靜脈,形成供血主要來自腹面的尾正中動,回血主要依靠兩側(cè)的尾側(cè)靜脈,符合腹面動脈保護(hù)的安全性,同時利于血管散熱,尾橫動脈提供了不同血源體系的溝通渠道。參考文獻(xiàn)[王蕾,葉明霞.大鼠尾部血管的解剖結(jié)構(gòu)與鼠尾的生理功能探討]。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠尾動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠尾動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠補(bǔ)體成分5 英文名稱: Mouse Compleme Compone 5 英文縮寫: C5
小鼠結(jié)締組織生長因子 英文名稱: Mouse Connective Tissue Growth Factor 英文縮寫: CTGF
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PE-Cy5標(biāo)記人CD62E/CD62P單克隆抗體
環(huán)指蛋白207抗體
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ENTPD3 Protein Human 重組人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白
C Protein Mouse 重組小鼠 C / SLAMF2 / BC僀?僀
DAD1 (dopamine D1 receptor 1mgDAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受體-D1抗原
ENTPD3 Protein Human 重組人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白
CDH13重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白 Protein
C Protein Mouse 重組小鼠 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白
IL16重組人 IL16 / Interleukin-16 蛋白 Protein
小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat soluble receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (sRANKL) ELISA Kit 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)試劑盒
Humaecombinationactivatinggene1,RAG-1ELISAKit 人重組激活基因1(RAG-1)pcr檢測試劑盒分裝
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植物賴(lysine)含量化學(xué)比色法定量試劑盒20次
HumanVitaminB6,VB6ELISAKit人B6(VB6)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠尾動脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠叉頭框蛋白P3(FoxP3)試劑盒 ,英文名: FoxP3 ELISA Kit
Mouse L phenylalanine ammonia lyase (PAL) ELISA Kit 小鼠L苯解氨酶(PAL)試劑盒
ELISA 小鼠粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mouse GM-CSF) 分裝
CLIAKitforLDH(HumanLactateDehydrogenase)ELISAKit人乳酸脫氫酶
通用型N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(NAT)活性高效液相層析法(HPLC)定量試劑盒20次
ELISAKitIFN-γ猴γ干擾素
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
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