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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
小鼠直腸黏膜上皮細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
小鼠直腸黏膜上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞 兔骨髓單核細(xì)胞 鋅指蛋白ZBTB38抗體 人彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤；TMD8 眼發(fā)育相關(guān)基因蛋白ODAG抗體 小鼠表皮角化細(xì)胞 FGFR1癌基因伴侶蛋白2抗體 SBC-2（人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞）
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：1182
更新時(shí)間：2024-11-07
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠直腸黏膜上皮細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
直腸 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X8546 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠直腸黏膜上皮分離自直腸組織；直腸為大腸的未段，位于小骨盆內(nèi)。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結(jié)腸，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿過盆膈，下端以門而終。直腸上端的大小似結(jié)腸，其下端擴(kuò)大成直腸壺腹，是糞便排出前的暫存部位，下端變細(xì)接管。直腸在盆腔內(nèi)的位置與骶椎腹面關(guān)系密切，與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶，位于膀胱和生殖器官的背側(cè)。直腸的動(dòng)脈血供主要是來自腸系膜下動(dòng)脈的直腸上動(dòng)脈，來自髂內(nèi)動(dòng)脈的直腸中動(dòng)脈和來自髂內(nèi)動(dòng)脈的直腸下動(dòng)脈。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機(jī)體面對(duì)病原微生物的第一道防線。因此，腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠直腸黏膜上皮采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠直腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠直腸黏膜上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒 小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒 小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒、小鼠0酸肌醇3激酶eisa試劑盒
小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶試劑盒 小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶試劑盒 小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶試劑盒、小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶eisa試劑盒
小鼠細(xì)胞蛋白試劑盒 小鼠細(xì)胞蛋白試劑盒 小鼠細(xì)胞蛋白試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠細(xì)胞蛋白試劑盒、小鼠細(xì)胞蛋白eisa試劑盒
小鼠可溶性試劑盒 小鼠可溶性試劑盒 小鼠可溶性試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠可溶性試劑盒、小鼠可溶性eisa試劑盒
纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子4抗體
GLIS1蛋白抗體
IL4R重組大鼠 IL4R / Il4ra 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
DNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原 0.5mgDNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原
USP5重組人 USP5 / ISOT 蛋白 Protein
CSAG1 Protein Human 重組人 CSAGE / CSAG1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
TNFRSF10B Protein Mouse 重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋僀
DNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原 0.5mgDNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原
CSAG1 Protein Human 重組人 CSAGE / CSAG1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL4R重組大鼠 IL4R / Il4ra 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
TNFRSF10B Protein Mouse 重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白
USP5重組人 USP5 / ISOT 蛋白 Protein
小鼠前列腺素F(PGF)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Human thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 人抗復(fù)合物(TAT)試劑盒
HumanArginase,ArgELISAKit 人精酶(Arg)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-α試劑盒豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒10次
MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠直腸黏膜上皮細(xì)胞大鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM2)試劑盒 ，英文名： ICAM2 ELISA Kit
Mouse somatostatin (SS) ELISA Kit 小鼠(SS)試劑盒
MouseCyclicguanosinemonophosphate,cGMPELISAKit 小鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
CLIAKitforHSP-40(HumanHeatShockProtein40)ELISAKit人熱休克蛋白40
細(xì)胞MAPKAPKINASE3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-17大鼠白介素17
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