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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

小鼠氣管平滑肌細(xì)胞

產(chǎn)品簡介:

小鼠氣管平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:M期磷蛋白10抗體 鋅指蛋白537抗體 TRIM72蛋白抗體 小鼠乳腺上皮細(xì)胞 大鼠胚胎肝母細(xì)胞 小鼠胚胎干細(xì)胞;ES-E14TG2a 人滋養(yǎng)細(xì)胞;HTR-8

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:3360

更新時間:2024-11-04

產(chǎn)品特性Product characteristics

小鼠氣管平滑肌細(xì)胞

小鼠氣管平滑肌細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

氣管

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7018

細(xì)胞簡介:

小鼠氣管平滑肌分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。氣管平滑肌是氣管的重要結(jié)構(gòu)組成之一,在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用;能夠保持氣道張力,維持氣道管狀形態(tài),從而有利于氣體流通,保持肺部通氣。氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。氣管平滑肌細(xì)胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一,其增生、肥大是氣道重塑的關(guān)鍵。

方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠氣管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的小鼠氣管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

小鼠氣管平滑肌細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠氣管平滑肌細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

札如病毒(SV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

人星狀病毒(HastV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

肉毒桿菌(A/B)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

肉毒桿菌(E/F)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

植物鈣調(diào)0酸酶(CaN)試劑盒

Human ai perinuclear factor (APF) ELISA Kit 人抗核周因子抗體(APF)試劑盒

Porcinetumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 豬壞死因子α(TNF-α)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforADV-IgG(HumanAdenovirusIgG)ELISAKit人腺病毒IgG

血液樣品固著液(Aceticalcohol固著液)50毫升

MouseSomatostatin,SSELISAKit小鼠(SS)試劑盒

MRVI1蛋白抗體

FITC標(biāo)記人CD41單克隆抗體

HA重組甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

RRAD (Ras-related associated with diabetes 0.5mgRRAD (Ras-related associated with diabetes ) RRAD(多肽抗原)

MMP8重組人 MMP8 / CLG1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ACOT13 Protein Human 重組人 THEM2 / ACOT13 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IGF1R Protein Human 重組人 IGF1R / CD221 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RRAD (Ras-related associated with diabetes 0.5mgRRAD (Ras-related associated with diabetes ) RRAD(多肽抗原)

ACOT13 Protein Human 重組人 THEM2 / ACOT13 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IGF1R Protein Human 重組人 IGF1R / CD221 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MMP8重組人 MMP8 / CLG1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

小鼠氣管平滑肌細(xì)胞大鼠復(fù)制蛋白A1(RPA1)試劑盒 ,英文名: RPA1 ELISA Kit

Rat beta amyloid (A beta 1-42 1-42) ELISA Kit 大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒

RatVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforDsg-1(Humandesmogleins1)ELISAKit人橋粒芯糖蛋白-1

細(xì)胞培養(yǎng)液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)比色法定量試劑盒(超氧陰離子)100

RatHistamine,HISELISAKit大鼠組胺(HIS)試劑盒

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行



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