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更新時(shí)間:2024-11-05
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:大鼠鼻黏膜上皮細(xì)胞
組織來(lái)源:鼻黏膜
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠鼻黏膜上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠鼻黏膜上皮分離自鼻黏膜組織;黏膜是覆蓋在機(jī)體內(nèi)消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu),由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。根據(jù)部位不同,有口腔黏膜、胃腸黏膜、鼻腔黏膜、氣管黏膜、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結(jié)構(gòu)也因功能、部位不一而不盡相同。鼻腔黏膜,簡(jiǎn)稱鼻黏膜,覆蓋于鼻腔表面,黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。根據(jù)結(jié)構(gòu)與功能的不同,鼻黏膜又分為前庭部、呼吸部和嗅部三部分。前庭部是鄰近外鼻孔的部分,有豐富的鼻毛可以阻擋空氣中較大的塵粒吸入。呼吸部占鼻黏膜的大部,有發(fā)達(dá)的上皮纖毛,它們可向咽部擺動(dòng),黏著有塵粒、細(xì)菌的黏液排向咽部,最終將它們排出體外。此外,此部分有豐富的血管與腺體,對(duì)吸入的空氣有加溫和濕潤(rùn)作用。嗅部黏膜范圍較小,主要位于鼻腔頂部。它含有一種專司嗅覺的嗅細(xì)胞及嗅腺,它們分泌能溶解到達(dá)嗅區(qū)的含氣味的微粒,刺激嗅細(xì)胞表面上的嗅毛產(chǎn)生嗅覺,而且還由于嗅細(xì)胞具有不同的受體,可分別接受不同化學(xué)分子的刺激,因此可產(chǎn)生不同的嗅覺。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠鼻黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠鼻黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒 兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒、兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔骨保護(hù)素試劑盒 兔骨保護(hù)素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔骨保護(hù)素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔骨保護(hù)素試劑盒、兔骨保護(hù)素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔鉤端IgG試劑盒 兔鉤端IgG試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔鉤端IgG試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔鉤端IgG試劑盒、兔鉤端IgG 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔分泌型免疫球蛋白A試劑盒 兔分泌型免疫球蛋白A試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔分泌型免疫球蛋白A試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔分泌型免疫球蛋白A試劑盒、兔分泌型免疫球蛋白A 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA 試劑盒 96T/48T
The rat gasic cancer marker CA199ELISA Kit 大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199試劑盒
HumanCystatinC,Cys-CELISAKit 人半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCompleme1inhibitoraoaibody,C1INH試劑盒人補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織AX1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanpyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISAKit人交聯(lián)物(PY)試劑盒規(guī)格:96T/48T
TOMM20L蛋白抗體
精液凝固蛋白2抗體
FGF18重組小鼠 FGF18 / FGF-18 蛋白 Protein
CAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗原 0.5mgCAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗原
TYRP1重組人 TRP1 / TYRP1 蛋白 Protein
HSPA8 Protein Human 重組人 HSPA8 / HSC70 蛋白
CDH8 Protein Rat 重組大鼠 Cadherin-8 / CDH8 蛋白
CAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗原 0.5mgCAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗原
HSPA8 Protein Human 重組人 HSPA8 / HSC70 蛋白
FGF18重組小鼠 FGF18 / FGF-18 蛋白 Protein
CDH8 Protein Rat 重組大鼠 Cadherin-8 / CDH8 蛋白
TYRP1重組人 TRP1 / TYRP1 蛋白 Protein
大鼠鼻黏膜上皮細(xì)胞大鼠表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)試劑盒 ,英文名: EGFR ELISA Kit
Mouse alpha hydroxybyrate dehydrogenase (HBDH) ELISA Kit 小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)試劑盒
ELISA 小鼠凋亡相關(guān)因子配體(mouse Fas Ligand) 進(jìn)口分裝
CLIAKitfom-1ELISAKit大鼠腎損傷分子1
通用型蛋白免疫共沉淀(蛋白G樹脂)試劑盒10次
ELISAKitMHCⅡ/H-1Ⅱ大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類
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