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基礎信息Product information
產(chǎn)品名稱:

大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞

產(chǎn)品簡介:

大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品:G蛋白偶聯(lián)受體81抗體 膜相關環(huán)指蛋白1抗體 初生多肽相關復合物亞單位α,肌肉特異型蛋白抗體 大鼠Ⅱ型肺泡上皮 雞小腸黏膜上皮細胞

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:136

更新時間:2024-10-27

產(chǎn)品特性Product characteristics

大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞

大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

肺組織

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

上皮細胞樣

YS-01X7008

細胞簡介:

大鼠Ⅱ型肺泡上皮分離自肺組織;肺泡由單層上皮細胞構成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復分枝成無數(shù)細支氣管,它們的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即為肺泡。小肺泡細胞,又稱I型肺泡細胞,厚約0.1微米,基底部是基底膜,無增殖能力。大肺泡細胞,又稱Ⅱ型肺泡細胞,分泌表面活性物質(zhì)(二棕櫚酰),以降低肺泡表面張力。Ⅱ型肺泡細胞位于Ⅰ型肺泡細胞之間,數(shù)量較Ⅰ型肺泡細胞多,但覆蓋面積比Ⅰ型肺泡細胞小。細胞立方形或圓形,頂端突入肺泡腔。細胞核圓形,胞質(zhì)著色淺、呈泡沫狀。電鏡下,細胞游離而有少量微絨毛,胞質(zhì)內(nèi)富含線粒體和溶酶體,有較發(fā)達的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復合體。核上方有較多的分泌顆粒,電子密度高、大小不等,直徑約0.1-1.0μm顆粒內(nèi)含有平行排列的板層狀結構,稱為嗜餓性板層小體。小體內(nèi)的主要成分為磷脂,以二棕櫚酰為主,此外還有糖胺多糖及蛋白質(zhì)等。顆粒內(nèi)物質(zhì)釋放出來后,在肺泡表面形成一層粘液層,稱為表面活性物質(zhì)(surfactant)。表面活性物質(zhì)有降低肺泡表面張力、穩(wěn)定肺泡大小的作用。呼氣時肺泡縮小,表面活性物質(zhì)密度增加,表面張力降低,防止肺泡過度塌陷;吸氣時肺泡擴張,表面活性物質(zhì)密度減小,肺泡回縮力加大,可防止肺泡過度膨脹。表面活性物質(zhì)的缺乏或變性均可引起肺不張,過度通氣可造成表面活性物質(zhì)缺乏;吸入毒氣可直接破壞表面活性物質(zhì)。Ⅱ型肺泡細胞有分裂、增殖并分化為Ⅰ型肺泡細胞的潛能,故具有修復受損傷上皮的作用。

方法簡介:

公司實驗室分離的大鼠Ⅱ型肺泡上皮采用彈性蛋白酶灌注消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的大鼠Ⅱ型肺泡上皮經(jīng)SP-C免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%


大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠血管緊張素 I (mouse ANG I)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 Phoenix

小鼠血管緊張素 II (mouse ANG II)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 Phoenix

mouse CD 40L ELISA Kit   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   奧地利 Bender

大鼠 C 反應蛋白 (rat CRP)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 ADI

小鼠仙臺病毒(Sendai)檢測試劑盒 96T/48T

Rat bone morphogenetic protein 4 (BMP-4) ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)檢測試劑盒

Humanproteinase-aineuophilcytoplasmicaibody,PR3-ANCAELISAKit 人蛋白酶3特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Chickenheparansulfate,HS檢測試劑盒雞類肝素(HS)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

載玻片細胞CDK4蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseHeatShockProtein70,Hsp-70ELISAKit小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

新型抑癌基因抗體

NF-kappa-B抑制子beta抗體

CCL2重組小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 Protein

1α(MEP1α)重組蛋白 Recombinant Meprin A Alpha (MEP1a)

RIOK1重組人 RIOK1 / RIO kinase 1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

CDC37 Protein Human 重組人 CDC37 / CDC37A 蛋白 (GST 標簽)

IgG Protein Rabbit 重組兔 IgG-Fc 蛋白 (185 Thr/Ala, Asn 284/Ser)

1α(MEP1α)重組蛋白 Recombinant Meprin A Alpha (MEP1a)

CDC37 Protein Human 重組人 CDC37 / CDC37A 蛋白 (GST 標簽)

CCL2重組小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 Protein

IgG Protein Rabbit 重組兔 IgG-Fc 蛋白 (185 Thr/Ala, Asn 284/Ser)

RIOK1重組人 RIOK1 / RIO kinase 1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞豬組織因子(TF)ELISA 試劑盒

Peroxisome proliferator activated receptor alpha (PPAR- alpha) ELISA Kit 人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)檢測試劑盒

Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforApo-H(HumanApolipoproteinH)ELISAKit人載脂蛋白H

溴脫氧尿核苷(BrdU)溶液(100毫摩爾)1毫升

Porcinemyelinbasicprotein,MBPELISAKit豬髓0脂堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。


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