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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
大鼠脾淋巴細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
大鼠脾淋巴細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：鋅指蛋白ZNF265抗體 磷酸化細(xì)胞分化周期蛋白37抗體 利鈉肽受體A抗體 大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞 豬前脂肪細(xì)胞 倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞；BHK-21 HSC-T6 (大鼠肝星形細(xì)胞)
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問(wèn)量：125
更新時(shí)間：2024-10-27
產(chǎn)品特性Product characteristics
大鼠脾淋巴細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
脾臟組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 不規(guī)則細(xì)胞 | YS-01X7537 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠脾淋巴分離自脾臟組織；脾臟是機(jī)體最大的免疫器官，占全身淋巴組織總量的25%，含有大量的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，是機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫的中心。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處，與9－11肋相對(duì)，長(zhǎng)軸與第10肋一致。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰，前方有胃，后方與左腎、左腎上腺毗鄰，下端與結(jié)腸脾溝相鄰，地柔軟的網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞器官。淋巴細(xì)胞（lymphocyte）白細(xì)胞的一種，由淋巴器官產(chǎn)生，機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分。淋巴器官根據(jù)其發(fā)生和功能的差異，可分為中樞淋巴器官（又名初級(jí)淋巴器官）和周圍淋巴器官（又名次級(jí)淋巴器官）兩類。前者包括胸腺、腔上囊或其相當(dāng)器官（有人認(rèn)為在哺乳動(dòng)物是骨髓）。它們無(wú)須抗原刺激即可不斷增殖淋巴細(xì)胞，成熟后將其轉(zhuǎn)送至周圍淋巴器官。后者包括脾、淋巴結(jié)等。成熟淋巴細(xì)胞需依賴抗原刺激而分化增殖，繼而發(fā)揮其免疫功能。
方法簡(jiǎn)介：
見說(shuō)明
質(zhì)量檢測(cè)：
本公司生產(chǎn)的大鼠脾淋巴采用機(jī)械研磨法結(jié)合密度梯度離心法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為1×10^6cells/瓶；細(xì)胞純度可達(dá)95%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
RPMI-1640、FBS、淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人重去甲上腺素(NE-B)檢測(cè)試劑盒 96T/48T
人血管生長(zhǎng)因子(TAF)檢測(cè)試劑盒 96T/48T
人相關(guān)抗原(TAA)檢測(cè)試劑盒 96T/48T
人特異性抗原(TSA)檢測(cè)試劑盒 96T/48T
豚鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： ACTH ELISA Kit
Many people immunoglobulin receptor (poly-IgR) ELISA Kit 人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)檢測(cè)試劑盒
rabbitN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBeta-HexA(MouseBeta-hexosaminidaseA)ELISAKit小鼠β氨基己糖苷酶A
細(xì)菌細(xì)胞色素氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit兔子透明質(zhì)酸(HA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
羊抗人球蛋白A
PE標(biāo)記人CD45RB單克隆抗體
FZD5重組人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)重組蛋白 Recombinant Nerve Growth Factor (NGF)
TRIP10重組人 TRIP10 / Cip4 蛋白 Protein
IL3RA Protein Human 重組人 IL3RA / CD123 蛋白
HA Protein Influenza 重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)重組蛋白 Recombinant Nerve Growth Factor (NGF)
IL3RA Protein Human 重組人 IL3RA / CD123 蛋白
FZD5重組人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein Influenza 重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
TRIP10重組人 TRIP10 / Cip4 蛋白 Protein
大鼠脾淋巴細(xì)胞豬肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA 試劑盒
Human Ureaplasma urealyticum aibody (UU-Ab) ELISA Kit 人解脲脲原體抗體(UU-Ab)檢測(cè)試劑盒
PorcineEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 豬內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAlpha-bungarotoxin,Alpha-BGTELISAKitα-銀環(huán)蛇毒素
血液賴(lysine)含量化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
NudeMouseProteinPhosphatase,PPELISAKit裸鼠蛋酸酶(PP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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