服務(wù)熱線
021-59989018
歡迎訪問上海研生實(shí)業(yè)有限公司網(wǎng)站
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品型號(hào):
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:86
更新時(shí)間:2024-10-29
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:大鼠臍靜脈平滑肌細(xì)胞
組織來(lái)源:臍帶組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠臍靜脈平滑肌分離自臍帶組織;它是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一,在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu),臍帶中通過尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動(dòng)脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管,與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運(yùn)送至胎盤,臍靜脈將O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒。血管平滑肌是許多重大血管疾病的細(xì)胞基礎(chǔ);血管平滑肌細(xì)胞的異常增加的生長(zhǎng)潛力在血管疾病發(fā)生過程中起決定作用。由于臍帶是分娩過程中的廢棄物,同時(shí)從臍帶中分離人臍靜脈平滑肌細(xì)胞方法相對(duì)成熟,使得體外培養(yǎng)的臍靜脈平滑肌細(xì)胞作為研究血管的模型細(xì)胞。臍靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠臍靜脈平滑肌采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠臍靜脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒 人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒、人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2試劑盒 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α試劑盒 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
豚鼠甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)絲酸蛋白酶1(MASP1)試劑盒 ,英文名: MASP1 ELISA Kit
Human calnexin (calnexin) ELISA Kit 人鈣聯(lián)蛋白(calnexin)試劑盒
rabbitCoicosterone,COELISAKit 兔子皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforB7-2/sCD86(MousesolubleClusterofdiffereiation86)ELISAKit小鼠可溶性CD86
線蟲甲磺酸乙脂(EMS)誘導(dǎo)突變?cè)噭┖?span>10次
RabbitBcl-2AssaciatedXprotein,BAXELISAKit兔Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)試劑盒規(guī)格:96T/48T
ras癌基因家族Rab9蛋白抗體
磷酸化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1抗體
YWHAE重組小鼠 14-3-3 epsilon / YWHAE 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
2,4-D/KLH(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid 5mg2,4-D/KLH(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid) 2,4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)血藍(lán)蛋白
NRG1重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD) Protein
IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白
IL3 Protein Rat 重組大鼠 IL3 / interleukin 3 蛋白
凋亡相關(guān)因子(FAS)重組蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis (FAS)
IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白
AIMP1重組小鼠 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 Protein
LTBR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 LTBR / TNFRSF3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
KCNIP3重組人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白 Protein
大鼠臍靜脈平滑肌細(xì)胞兔子促黃體激素(LH)ELISA 試劑盒
Human vascular endothelial cadherin complex (VE-cad) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)試劑盒
Humanai-neuophilaibody,ANAELISAKit 人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanerythrocytemembraneprotein,EMP試劑盒人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織RSE激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanOsteoprotegerin,OPGELISAKit人骨保護(hù)素(OPG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
下一篇:大鼠氣管平滑肌細(xì)胞