服務(wù)熱線
021-59989018
歡迎訪問(wèn)上海研生實(shí)業(yè)有限公司網(wǎng)站
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品型號(hào):
廠商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
訪問(wèn)量:98
更新時(shí)間:2024-10-30
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
肝臟組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X7186 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝竇內(nèi)皮細(xì)胞(SEC)是肝臟內(nèi)所占比例最高的非實(shí)質(zhì)細(xì)胞,位于肝竇腔與肝細(xì)胞之間,具有物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于擁有一般細(xì)胞所沒(méi)有的窗孔結(jié)構(gòu)、細(xì)胞間連結(jié)松散、內(nèi)皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性,從而達(dá)到快速交換各種大小分子的目的。肝在遭到多種病原侵襲時(shí),肝竇內(nèi)皮細(xì)胞窗孔逐漸減少或消失,內(nèi)皮下基膜形成,產(chǎn)生類(lèi)似于連續(xù)型毛細(xì)血管的結(jié)構(gòu),這一過(guò)程稱(chēng)為肝竇毛細(xì)血管化。它由多種因素引起,其過(guò)程極復(fù)雜,在多種肝病的發(fā)病前期階段均有出現(xiàn),近年來(lái)受到廣泛關(guān)注。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝竇內(nèi)皮采用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心、密度梯度離心法,并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝竇內(nèi)皮經(jīng)CD31、CD14免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
兔子細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
兔子細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA 試劑盒
Human aspaate aminoansferase / aspaate aminoansferase (GOT/GPT) ELISA Kit 人天門(mén)冬轉(zhuǎn)氨酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT/GPT)試劑盒
Humanmitogenactivitedproteinkinase,MAPKELISAKit 人原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanbrain-gpeptides,BGP/Gehrelin試劑盒人腦腸肽(BGP/Gehrelin)試劑盒
植物組織微粒體分離試劑盒20次
Humanspleeyrosinekinase,SykELISAKit人脾臟酪激酶(Syk)試劑盒
(II)重鏈抗體
周期素D1重組兔單克隆抗體
CNDP2重組小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
Argireline peptide 抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3 1gArgireline peptide 抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3
GNGT1重組人 GNGT1 / GNG1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
GAD1 Protein Human 重組人 GAD67 / GAD1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ACVR1 Protein Rat 重組大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白
Argireline peptide 抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3 1gArgireline peptide 抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3
GAD1 Protein Human 重組人 GAD67 / GAD1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CNDP2重組小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ACVR1 Protein Rat 重組大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白
GNGT1重組人 GNGT1 / GNG1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子A(PDGFA)試劑盒 ,英文名: PDGFA ELISA Kit
Mouse coagulation factor IX (F IX) ELISA Kit 小鼠Ⅸ(FⅨ)試劑盒
Mousehepatocytegrowthfactor,HGFELISAkit 小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumancoagulationfactorVIIIrelatedaigen,FVIII-AgELISAKit人Ⅷ相關(guān)抗原
細(xì)胞CDK5/P25激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIP-10/CXCL鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10