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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

人骨髓間充質(zhì)干細胞

產(chǎn)品簡介:

人骨髓間充質(zhì)干細胞公司正在出售的產(chǎn)品:聚磷酸肌醇磷酸酶4A抗體 冠狀病毒抗體 多核苷酸磷酸化酶蛋白抗體 人呼吸道上皮細胞 兔胃平滑肌細胞 NCI-H1092 人小細胞肺癌細胞 EL4 (小鼠淋巴瘤細胞)

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:117

更新時間:2024-10-30

產(chǎn)品特性Product characteristics

人骨髓間充質(zhì)干細胞

人骨髓間充質(zhì)干細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

骨髓

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

成纖維細胞樣

YS-01X7506

細胞簡介:

人骨髓間充質(zhì)干細胞BMSC)分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的骨髓間充質(zhì)干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細胞。在骨髓中,BMSC占骨髓有核細胞總數(shù)的0.001%-0.1%,含量極低。骨髓間充質(zhì)干細胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,在培養(yǎng)過程中,受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。

方法簡介:

公司實驗室分離的人骨髓間充質(zhì)干采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的人骨髓間充質(zhì)干經(jīng)CD29、CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

人骨髓間充質(zhì)干細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

人骨髓間充質(zhì)干細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠血小板膜糖蛋白Ⅱba(GP-ba/CD41+CD61)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat thyroxine (T4) ELISA Kit 大鼠甲狀腺素(T4)試劑盒

HumanChromogranin,CgAELISAKit 人嗜鉻蛋白A(CgA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human5-Hydroxyyptamine,5HT試劑盒人5羥色胺(5-HT)試劑盒規(guī)格:96T/48T

真菌格蘭-韋革氏(Gram-Weige)染色試劑盒50

MouseAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

熱休克蛋白-47抗體

組蛋白H1抗體

TREM1重組人 TREM1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

信號素5B(SEMA5B)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 5B (SEMA5B)

LDLRAD3重組人 LDLRAD3 蛋白 (ECD, Fc 標簽) Protein

CTLA4 Protein Human 重組人 CTLA4 / CD152 蛋白 (His & Fc 標簽)

信號素5B(SEMA5B)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 5B (SEMA5B)

CTLA4 Protein Human 重組人 CTLA4 / CD152 蛋白 (His & Fc 標簽)

TREM1重組人 TREM1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

 

LDLRAD3重組人 LDLRAD3 蛋白 (ECD, Fc 標簽) Protein

人骨髓間充質(zhì)干細胞大鼠血管生成素樣蛋白1(ANGPTL1)試劑盒 ,英文名: ANGPTL1 ELISA Kit

Mouse prostaglandin F (PGF) ELISA Kit 小鼠前列腺素F(PGF)試劑盒

MouseStemCellFactorReceptor,SCFRELISAkit 小鼠干細胞因子受體(SCFR)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanBeta-Thromboglobulin,Beta-TGELISAKit人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白

細胞DNA損傷彗星熒光試劑盒20

ELISAKitAZT大鼠

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。


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