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產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:90
更新時(shí)間:2024-10-30
人脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
脈絡(luò)膜組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X7317 |
細(xì)胞簡介:
人脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮分離自眼球脈絡(luò)膜組織;脈絡(luò)膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間,含有豐富血管和色素細(xì)胞,對外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差,當(dāng)眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時(shí),堅(jiān)硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,使脈絡(luò)膜在內(nèi)外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡(luò)膜呈暗褐色,圍繞視神經(jīng)乳頭部有照膜,為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡(luò)膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜,由纖維組織、小血管和毛細(xì)血管組成,軟而薄,棕紅色,在鞏膜和視網(wǎng)膜之間,續(xù)連于睫狀體后方。脈絡(luò)膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層,其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及玻璃體,并有遮光作用,使反射的物象清楚。同時(shí)對視覺系統(tǒng)起保護(hù)作用,對整個視覺神經(jīng)有調(diào)節(jié)作用。續(xù)連于睫狀體后方,含豐富的血管和色素細(xì)胞,有營養(yǎng)和遮光作用。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子前列腺素E2(PGE2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子前列腺素E1(PGE1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子皮質(zhì)/上腺(CO)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human homocysteic acid (Hcy) ELISA Kit 人同型半胱(Hcy)試劑盒
Humanapoptosissignalregulatingkinase1,ASK-1ELISAKit 人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBullousPemphigoid,BP試劑盒人大皰性類天皰瘡抗體(BP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次
HumansolubleTumorNecrosisFactorαreceptor,sTNFαRELISAKit人可溶性壞死因子α受體(sTNFαR)試劑盒規(guī)格:96T/48T
同源盒蛋白GSC抗體
COX4NB蛋白抗體
TNFRSF14重組小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
Camk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG 0.5mgCamk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG) 鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗原
CYB5R1重組人 CYB5R1 蛋白 Protein
GALK1 Protein Human 重組人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
SIRPA Protein Rat 重組大鼠 SIRP alpha / CD172a 蛋白
Camk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG 0.5mgCamk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG) 鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗原
GALK1 Protein Human 重組人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
TNFRSF14重組小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
SIRPA Protein Rat 重組大鼠 SIRP alpha / CD172a 蛋白
CYB5R1重組人 CYB5R1 蛋白 Protein
人脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠纖調(diào)蛋白(FMOD)試劑盒 ,英文名: FMOD ELISA Kit
Mouse chorionic gonadoopin beta (-CG beta) ELISA Kit 小鼠絨毛膜β(β-CG)試劑盒
Mouseiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit 小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHTLV-I(Huma-lymphoopicvirusI)ELISAKit人類嗜T淋巴細(xì)胞Ⅰ型病毒
細(xì)胞HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitBTA大鼠膀胱腫瘤抗原
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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