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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-10-30
人支氣管上皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
支氣管組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 不規(guī)則細胞 | YS-01X7040 |
細胞簡介:
人支氣管上皮分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由氣管分出的各級分枝,由氣管分出的一級支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細長,走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經(jīng)氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是,氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細胞,還作為效應(yīng)細胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細胞因子,從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng)。支氣管上皮細胞在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺癌、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道疾病的發(fā)病機制中均起著重要的作用。體外培養(yǎng)的原代支氣管上皮細胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上存在很大的相似性,因此,在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
見說明
質(zhì)量檢測:
本公司生產(chǎn)的支氣管上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合機械刮刷并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
M199、FBS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠骨粘連蛋白(ON)試劑盒 96T/48T
小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒 96T/48T
小鼠骨形成蛋白(BMPs)試劑盒 96T/48T
小鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)試劑盒 96T/48T
小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human noradrenaline (NA) ELISA Kit 人去甲(NA)試劑盒
HumanFibrinELISAKit 人血纖蛋白(Fibrin)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanamiodarone,AD試劑盒人呋同(AD)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物蛋白巰基/結(jié)合巰基含量比色法定量試劑盒20次
MonkeyIerferonγ,IFN-γELISAKit猴γ干擾素(IFN-γ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞S期激酶相關(guān)蛋白2抗體
Evx1蛋白抗體
NRP1重組食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 Protein
IL-2 (Interleukin-2 0.5mgIL-2 (Interleukin-2)Mouse、Ret 白介素2抗原(大、小鼠)
PDE4B重組人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
DPEP1 Protein Human 重組人 Dehydropeptidase-I / DPEP1 蛋白
CHI3L1 Protein Mouse 重組小鼠 CHI3L1 / YKL40 / gp39 蛋白
IL-2 (Interleukin-2 0.5mgIL-2 (Interleukin-2)Mouse、Ret 白介素2抗原(大、小鼠)
DPEP1 Protein Human 重組人 Dehydropeptidase-I / DPEP1 蛋白
NRP1重組食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 Protein
CHI3L1 Protein Mouse 重組小鼠 CHI3L1 / YKL40 / gp39 蛋白
PDE4B重組人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
人支氣管上皮細胞大鼠細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(EMMPRIN)試劑盒 ,英文名: EMMPRIN ELISA Kit
Mouse neuropeptide Y (NP-Y) ELISA Kit 小鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)試劑盒
MouseapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHSP-90(MouseHeatShockProtein90)ELISAKit小鼠熱休克蛋白90
細胞JNK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-2sRβ大鼠白介素2可溶性受體β鏈
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