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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:107
更新時間:2024-10-30
人皮膚肥大細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
皮膚組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7355 |
細胞簡介:
人皮膚肥大分離自皮膚組織;皮膚肥大細胞廣泛分布于皮膚微血管周圍,分泌多種細胞因子,參與免疫調(diào)節(jié)(T細胞、B細胞、APC細胞活化)。皮膚肥大細胞表達MHC分子、B7分子,具有APC功能。表達大量的IgE-Fc受體,釋放過敏介質(zhì)。具有弱吞噬功能,和血液的嗜堿粒細胞同樣,具有強嗜堿性顆粒的組織細胞。存在于血液中的這類顆粒,含有肝素、組織胺、5-羥色胺,由細胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質(zhì),可在組織內(nèi)引起速發(fā)型過敏反應(yīng)(炎癥)。由于在肥大細胞上結(jié)合的IgE抗體和抗原的接觸,使細胞多陷于崩壞。肥大細胞呈圓形或卵圓形,細胞核小,呈圓形或橢圓形,染色淺,位于細胞中央。細胞常成堆或單個分布于血管附近。細胞呈圓形或卵圓形,細胞質(zhì)中充滿大小一致、染成藍紫色的顆粒,均勻分布在核周圍。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的人皮膚肥大采用膠原酶-混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人皮膚肥大經(jīng)MCG-35免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠C-反應(yīng)蛋白試劑盒 小鼠C-反應(yīng)蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠C-反應(yīng)蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠C-反應(yīng)蛋白試劑盒、小鼠C-反應(yīng)蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠CXC趨化因子受體試劑盒 小鼠CXC趨化因子受體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠CXC趨化因子受體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠CXC趨化因子受體試劑盒、小鼠CXC趨化因子受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠CXC趨化因子配體試劑盒 小鼠CXC趨化因子配體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠CXC趨化因子配體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠CXC趨化因子配體試劑盒、小鼠CXC趨化因子配體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠c-fos試劑盒 小鼠c-fos試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠c-fos試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠c-fos試劑盒、小鼠c-foseisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠巰基轉(zhuǎn)移酶(GST)試劑盒 96T/48T
Human retinol binding protein (RBP) ELISA Kit 人結(jié)合蛋白(RBP)試劑盒
HumansecretoryimmunoglobulinA,SIgAELISAKit 人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAi-smoothmuscleaibody,ASMA試劑盒人抗平滑肌抗體(ASMA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細胞周期S早期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次
HumanypsinELISAKit人(ypsin)試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體
GADD153抗體
EFNA5重組大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 Protein
H5N1-M2(Avian influenza Matrix Protein-2 0.5mgH5N1-M2(Avian influenza Matrix Protein-2) H5N1流感病毒M2型(抗原)
SLAMF6重組人 SLAMF6 / Ly108 蛋白 Protein
FCER1A Protein Human 重組人 FcERI / FCER1A 蛋白
MAP2K1 Protein Mouse 重組小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 蛋白 (His & GST 標簽)
H5N1-M2(Avian influenza Matrix Protein-2 0.5mgH5N1-M2(Avian influenza Matrix Protein-2) H5N1流感病毒M2型(抗原)
FCER1A Protein Human 重組人 FcERI / FCER1A 蛋白
EFNA5重組大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 Protein
MAP2K1 Protein Mouse 重組小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 蛋白 (His & GST 標簽)
SLAMF6重組人 SLAMF6 / Ly108 蛋白 Protein
人皮膚肥大細胞大鼠細胞間粘附分子5(ICAM5)試劑盒 ,英文名: ICAM5 ELISA Kit
Mouse growth hormone releasing peptide ghrelin (GHRP-Ghrelin) ELISA Kit 小鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)試劑盒
MouseTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit 小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHsp-40(MouseHeatShockProtein40)ELISAKit小鼠熱休克蛋白40
細胞MAPKAPKINASE2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-18大鼠白介素18