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更新時間:2024-10-30
人前列腺基質細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
前列腺 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7703 |
細胞簡介:
人前列腺基質分離自前列腺組織;前列腺(Prostate)是雄性的性腺器官;前列腺是不成對的實質性器宮,由腺組織和肌組織構成。前列腺如栗子,底朝上,與膀胱相貼,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面貼恥骨聯(lián)合,后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過,扼守著尿道上口,所以,前列腺有問題時,排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的,具有內、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是構成精液主要成分;作為內分泌腺,前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。常見疾病為良性前列腺增生,在病理學上良性前列腺增生癥又稱前列腺結節(jié)狀增生,是前列腺中最常見的產生癥狀的瘤樣病變,結節(jié)開始發(fā)生可能是基質細胞自發(fā)逆轉至胚胎階段,其生長潛力可能是基質-上皮之間的相互協(xié)同作用所致,最終形成前列腺增生。基質細胞是器官中結締組織細胞,起到為器官中實質細胞提供支持和營養(yǎng)的作用,成纖維細胞、炎癥細胞、免疫細胞以及周皮細胞都是常見的基質細胞類型。基質細胞和腫瘤細胞的相互作用在腫瘤細胞的生長過程中具有重要作用。體外培養(yǎng)人前列腺基質細胞對治療前列腺增生有重要的研究意義。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的人前列腺基質采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人前列腺基質經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 貼壁不包被
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
兔主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/RLAⅡ)試劑盒 96T/48T
兔主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/RLAⅠ)試劑盒 96T/48T
兔壞死因子α(TNF-α)試劑盒 96T/48T
兔脂蛋白α(Lp-α)試劑盒 96T/48T
小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human vitamin C (VC) ELISA Kit 人C(VC)試劑盒
Humancalmodulin,CAMELISAKit 人鈣調素(CAM)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanchemerin試劑盒人chemerin試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉基因玉米NK603品系試劑盒20次
Humanserineprotease,PRSSELISAKit人絲蛋白酶(PRSS)試劑盒規(guī)格:96T/48T
鋅指蛋白693抗體
LRIT3蛋白抗體
SEMA4D重組大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 蛋白 Protein
FOXJ1/HFH-4 peptide 插頭蛋白J1抗原 0.5mgFOXJ1/HFH-4 peptide 插頭蛋白J1抗原
SULT1A1重組人 SULT1A1 / STP1 蛋白 Protein
GPX7 Protein Human 重組人 GPX7 / Glutathione Peroxidase 7 蛋白 (Fc 標簽)
EPHB4 Protein Mouse 重組小鼠 EphB4 / HTK 蛋白
FOXJ1/HFH-4 peptide 插頭蛋白J1抗原 0.5mgFOXJ1/HFH-4 peptide 插頭蛋白J1抗原
GPX7 Protein Human 重組人 GPX7 / Glutathione Peroxidase 7 蛋白 (Fc 標簽)
SEMA4D重組大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 蛋白 Protein
EPHB4 Protein Mouse 重組小鼠 EphB4 / HTK 蛋白
SULT1A1重組人 SULT1A1 / STP1 蛋白 Protein
人前列腺基質細胞大鼠胃動蛋白1(GKN1)試劑盒 ,英文名: GKN1 ELISA Kit
Mouse aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒
Mousemonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAkit 小鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforhs-CRP(HumanhighsensitivityC-ReactiveProtein)ELISAKit人超敏C反應蛋白
細胞NAD依賴性甘油-3-0酸脫氫酶(NAD-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光譜法定量試劑盒20次
ELISAKitBTC大鼠β細胞素