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更新時間:2024-10-30
人神經(jīng)少突膠質細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7388 |
細胞簡介:
人神經(jīng)少突膠質分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。少突膠質細胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng),在銀浸染標本中,少突膠質細胞比星狀膠質細胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱為少突膠質細胞或寡突膠質細胞。但是用特異性免疫細胞化學染色顯示的少突膠質細胞,其突起并不少,而且還有許多分支。少突膠質細胞的主要功能是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中包繞軸突、形成絕緣的髓鞘結構、協(xié)助生物電信號的跳躍式高效傳遞并維持和保護神經(jīng)元的正常功能。其異常不僅會導致中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘病變,還會引起神經(jīng)元損傷或精神類疾病,甚至可以引發(fā)腦腫瘤。根據(jù)少突膠質細胞的分布和位置可分為三種:①束間少突膠質細胞(interfasicular-oligodendrocyte),分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的白質的神經(jīng)纖維束之間;②神經(jīng)細胞周少突膠質細胞(perineuronal-oligodendrocyte),分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的灰質區(qū),常位于神經(jīng)細胞周圍,與神經(jīng)細胞的關系密切,故又稱為神經(jīng)細胞周衛(wèi)星細胞(perineuronal-satellite-cell),但在神經(jīng)細胞胞體與此類細胞之間亦常有星形膠質細胞的薄片狀突起分隔;③血管周少突膠質細胞(pcrivascular-oligodendrocyte),主要分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內的血管周圍。少突膠質細胞形成的髓鞘膜是最為特化和復雜動物細胞膜之一,其上有眾多跨膜蛋白和表面蛋白用以維持髓鞘的致密穩(wěn)定結構。如半乳糖腦苷脂(GC),它是髓鞘的一種主要類脂,用GC抗體鑒別成熟的少突膠質細胞是一種比較早的免疫鑒定方法。近十年來,神經(jīng)發(fā)育學科進展較快,更多的少突膠質細胞分子標記物被鑒定出來,如PDGFRa、Mbp、CNP、SOX-10。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的人神經(jīng)少突膠質采用消化、混合細胞營養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結合差速貼壁法并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人神經(jīng)少突膠質經(jīng)GC(Galactocerebroside)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠5羥色胺試劑盒 小鼠5羥色胺試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠5羥色胺試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠5羥色胺試劑盒、小鼠5羥色胺eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠5核苷酸酶試劑盒 小鼠5核苷酸酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠5核苷酸酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠5核苷酸酶試劑盒、小鼠5核苷酸酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠25羥基試劑盒 小鼠25羥基試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠25羥基試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠25羥基試劑盒、小鼠25羥基eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽試劑盒 小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽試劑盒、小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠肝病毒(MHV)試劑盒
Human dihydrotestosterone (DHT) ELISA Kit 人雙氫(DHT)試劑盒
Humansolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISAKit 人可溶性血小板內皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)試劑盒 進口分裝
Humanai-toxoplasmaIgGaibody,ai-toxIgG試劑盒人抗弓形體IgM抗體(ai-toxIgM)試劑盒
植物氧化應激活性氧(ROS)比色法測定試劑盒(單線態(tài)氧氣)20次
Humanansferrieceptor,TFRELISAKit人轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)試劑盒
血小板內皮細胞黏附分子-1抗體
PECI蛋白抗體
YWHAB重組食蟹猴 14-3-3 beta / YWHAB 蛋白 Protein
MMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7 0.5mgMMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7) 基質金屬蛋白酶-7(抗原)
MMP8重組人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標簽)
ESM1 Protein Mouse 重組小鼠 ESM1 / Endocan 蛋白 (His 標簽)
MMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7 0.5mgMMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7) 基質金屬蛋白酶-7(抗原)
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標簽)
YWHAB重組食蟹猴 14-3-3 beta / YWHAB 蛋白 Protein
ESM1 Protein Mouse 重組小鼠 ESM1 / Endocan 蛋白 (His 標簽)
MMP8重組人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein
人神經(jīng)少突膠質細胞大鼠糖蛋白A33(GPA33)試劑盒 ,英文名: GPA33 ELISA Kit
Mouse glucoprotein 130 (gp130) ELISA Kit 小鼠糖蛋白130(gp130)試劑盒
RatEsadiol,E2ELISAKit 大鼠雌二醇(E2)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHLE(Humanleukocyteexastase)ELISAKit人白細胞彈性蛋白酶
細胞PKC激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitCNP大鼠C型尿肽
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