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更新時(shí)間:2024-10-30
人腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
腎組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X7259 |
細(xì)胞簡介:
人腎動脈內(nèi)皮分離自腎組織;腎臟是機(jī)體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎動脈的分支為葉間動脈,穿行于腎柱內(nèi),上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處,形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發(fā)出毛細(xì)血管,并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動脈,進(jìn)入腎小囊后形成球形的毛細(xì)血管網(wǎng),再匯集成出球小動脈,出腎小體。直小動脈分支形成毛細(xì)血管網(wǎng),再匯合成直小靜脈,入弓狀靜脈、葉間靜脈,最后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎,注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養(yǎng)血管,又是腎的機(jī)能血管,與腎泌尿機(jī)能密切相關(guān)。腎動脈在腎實(shí)質(zhì)內(nèi)形成兩個毛細(xì)血管網(wǎng):腎小球毛細(xì)血管網(wǎng),血壓較高,利于血漿濾過形成原尿;球后毛細(xì)血管網(wǎng),血壓較低,利于腎小管的重吸收。腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞是腎動脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞主要功能有:①在血漿濾過形成原尿的過程中起重要作用,②在腎小管的重吸收過程中起重要作用,③保持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腎動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腎動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISAKit ELISA.
小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit ELISA.
小鼠交聯(lián)物(PY)ELISAKit ELISA.
小鼠骨橋素(OPN)ELISAKit ELISA.
小鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA 試劑盒
Human aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 人水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒
HumancoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit 人Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanapelin12,AP12試劑盒人apelin12(AP12)ELISAKi
植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒50次
HumaotalproteinS,TPSELISAKit人總蛋白S(TPS)試劑盒
胰島細(xì)胞自身抗原相關(guān)蛋白PTPRN2抗體
PE標(biāo)記小鼠CD154單克隆抗體
FCGR2重組小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated Protein
ADAMTS7 peptide/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原 1mgADAMTS7 peptide/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原
TFAP2C重組人 TFAP2C / AP2-GAMMA 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標(biāo)簽)
CD14 Protein Rat 重組大鼠 CD14 蛋白
次0酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1(HPRT1)重組蛋白 Recombinant Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1)
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標(biāo)簽)
S100A9重組小鼠 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ALOX15B重組人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白 Protein
人腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠髓鞘關(guān)聯(lián)糖蛋白(MAG)試劑盒 ,英文名: MAG ELISA Kit
Mouse glycogen phosphorylase II (GP-II) ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)試劑盒
raesistinELISAKit 大鼠抵抗素(Resistin)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHIT(Humanheparinassociatedaibody)ELISAKit人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體
細(xì)胞RCT激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKit5-大鼠5核苷酸酶
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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