服務熱線
021-59989018
歡迎訪問上海研生實業(yè)有限公司網(wǎng)站
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質:經(jīng)銷商
訪問量:102
更新時間:2024-10-30
人腎小管上皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腎組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7580 |
細胞簡介:
人腎小管上皮分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質,如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調節(jié)水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進行。腎小管是機體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細長上皮性小管,具有重吸收(reabsorption)和排泌作用。腎小管按不同的形態(tài)結構、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠端小管三部分;近端小管可分為直部和曲部,曲部也稱為近曲小管,位于皮質迷路內,于腎小體附近高度蟠曲;遠端小管曲部也稱為遠曲小管,位于皮質迷路內。腎小管上皮細胞是腎小管外面的一層細胞,腎小管上皮細胞的分離、培養(yǎng)是研究腎臟疾病的一項重要技術,目前該分離方法有酶分離法、化學分離法篩網(wǎng)分離法、顯微解剖分離法、流式細胞儀分離法等。腎小管上皮細胞主要功能:①腎小管上皮細胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸;②排泌非營養(yǎng)物質進入終尿;③細胞能分泌炎癥介質如細胞因子和趨化因子,通過產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細胞參與急性炎癥反應;④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原,這說明腎小管上皮細胞參與腎免疫損傷的發(fā)生。隨著對腎間質纖維化機制研究的日漸加深,腎小管上皮細胞(RTECs)在其中的作用日益被人們重視。因此,提供良好的腎小管上皮細胞模型,在腎小管間質疾病的發(fā)病機制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的。
方法簡介:
公司實驗室分離的人腎小管上皮細胞 采用膠原酶消化結合差速貼壁法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人腎小管上皮細胞 經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
上腺髓質素(ADM)試劑盒 96T/48T
神經(jīng)膠質纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒 96T/48T
熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)試劑盒 96T/48T
腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒 96T/48T
豚鼠生長激素(GH)試劑盒 ,英文名: GH ELISA Kit
Human nerve growth factor (NGF) ELISA Kit 人的神經(jīng)生長因子(NGF)試劑盒
MonkeyLaminin,LNELISAKit層連蛋白/板層素(LN)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBLAPELISAKit(Rabbit)兔骨堿性0酸酶試劑盒
細菌耐酸(ACID-FAST)染色試劑盒50次
rabbitmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit兔子巨噬細胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒規(guī)格:96T/48T
抑癌基因p16抗體
RASGEF1B蛋白抗體
HAVCR2重組人 TIM-3 / HAVCR2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)重組蛋白 Recombinant Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3)
NTM重組人 NTM / Neurotrimin 蛋白 Protein
IL13RA1 Protein Human 重組人 IL13RA1 蛋白
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)重組蛋白 Recombinant Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3)
IL13RA1 Protein Human 重組人 IL13RA1 蛋白
HAVCR2重組人 TIM-3 / HAVCR2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
NTM重組人 NTM / Neurotrimin 蛋白 Protein
人腎小管上皮細胞大鼠速激肽受體2(TACR2)試劑盒 ,英文名: TACR2 ELISA Kit
Mice of homocysteine (Hcy) ELISA Kit 小鼠同型半胱(Hcy)試劑盒
ratCoicosterone,COELISAKit 大鼠皮質酮/腎上腺酮(CO)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHIS(MouseHistamine)ELISAKit小鼠組胺
細胞ROCK激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitPⅢ大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。