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更新時間:2024-10-30
人腎臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
腎 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X8174 |
細(xì)胞簡介:
人腎臟微血管內(nèi)皮分離自腎臟;腎臟是人體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水分及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎臟內(nèi)部的結(jié)構(gòu),可分為腎實質(zhì)和腎盂兩部分。在腎縱切面可以看到,腎實質(zhì)分內(nèi)外兩層:外層為皮質(zhì),內(nèi)層為髓質(zhì)。腎皮質(zhì)位于腎實質(zhì)表層,富含血管,新鮮時呈紅褐色,由一百多萬個腎單位組成。每個腎單位由腎小體和腎小管所構(gòu)成,部分皮質(zhì)伸展至髓質(zhì)錐體間,成為腎柱。腎髓質(zhì)位于腎皮質(zhì)的深面,血管較少,色淡紅,為10-20個錐體所構(gòu)成。腎錐體在切面上呈三角形。錐體底部向腎凸面,向腎門,錐體主要組織為集合管,錐體稱腎乳頭,每一個乳頭有10-20個乳頭管,向腎小盞漏斗部開口。在腎竇內(nèi)有腎小盞,為漏斗形的膜狀小管,圍繞腎乳頭。腎錐體與腎小盞相連接。每腎有7~8個腎小盞,相鄰2~3個腎小盞合成一個腎大盞。每腎有2~3個腎大盞,腎大盞匯合成扁漏斗狀的腎盂。腎盂出腎門后逐漸縮窄變細(xì),移行為輸尿管。腎單位是腎臟結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。腎小體包括腎小球和腎小囊。腎小體內(nèi)有一個毛細(xì)血管團(tuán),稱為腎小球,腎小球是個血管球。它由腎動脈分支形成。腎小球外有腎小囊包繞。腎小囊分兩層,兩層之間有囊腔與腎小管的管腔相通。腎小管匯成集合管。若干集合管匯合成乳頭管,尿液由此流入腎小盞。微血管又稱毛細(xì)血管。分布于各種組織和細(xì)胞間的最微細(xì)的血管。介于微動脈和微靜脈之間。平均直徑7~9微米,數(shù)量極多,成網(wǎng)狀分布。管壁由一層內(nèi)皮細(xì)胞及一薄層基膜組成,厚約0.5微米?;ね饷嬗斜咏Y(jié)締組織,其中有纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和周細(xì)胞等。最細(xì)的毛細(xì)血管由一個內(nèi)皮細(xì)胞圍成管腔,較粗的毛細(xì)血管由2~3個內(nèi)皮細(xì)胞圍成。分布于肌肉組織、神經(jīng)組織和結(jié)締組織中的毛細(xì)血管,內(nèi)皮細(xì)胞間為縫隙連接(縫隙寬150埃),稱連續(xù)毛細(xì)血管;分布于內(nèi)分泌腺、腎臟等處的毛細(xì)血管,除有縫隙連接外,細(xì)胞本身有許多小孔,(孔徑800~1000埃),稱有孔毛細(xì)血管;分布于肝、脾、骨髓及某些內(nèi)分泌腺的毛細(xì)血管,管腔擴(kuò)大,稱血竇。毛細(xì)血管的管壁薄、通透性大、管徑細(xì)(8~10微米)、數(shù)量多、血流速度慢,這些特點使其成為血液與組織液進(jìn)行物質(zhì)交換的場所,又稱交換血管。血竇(sinusoid)由毛細(xì)血管管腔擴(kuò)大而成,竇壁的一般結(jié)構(gòu)與毛細(xì)血管壁相同,由單層內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成,內(nèi)皮細(xì)胞膜上有窗孔。不同器官的竇壁結(jié)構(gòu)各有差別。脾血竇的內(nèi)皮細(xì)胞間有較寬裂隙;肝血竇內(nèi)皮細(xì)胞是不連續(xù)的,有較寬的細(xì)胞隙(0.1~0.5微米);肝、脾血竇的基膜不完整或無基膜,通透性比毛細(xì)血管大,較大的蛋白質(zhì)和血細(xì)胞可以通過。肝血竇壁內(nèi)有枯否細(xì)胞,脾血竇內(nèi)外有巨噬細(xì)胞,這兩種細(xì)胞都有吞噬能力,可吞噬清除血液中的異物、細(xì)菌等有害物質(zhì),是機(jī)體單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的重要組成分。某些內(nèi)分泌腺的血竇有連續(xù)的基膜。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
方法簡介:
實驗室分離的人腎臟微血管內(nèi)皮采用膠原酶消化,結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的人腎臟微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
人腎臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豚鼠免疫球蛋白G1試劑盒 豚鼠免疫球蛋白G1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠免疫球蛋白G1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠免疫球蛋白G1試劑盒、豚鼠免疫球蛋白G1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豚鼠免疫球蛋白E試劑盒 豚鼠免疫球蛋白E試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠免疫球蛋白E試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠免疫球蛋白E試劑盒、豚鼠免疫球蛋白Eeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒 豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒、豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒 豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒、豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠釋放激素(GH)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat calf iestine alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit 大鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)試劑盒
HumanSerumamyloidA,SAAELISAKit 人血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanbasicfibroblastgrowthfactor,bFGF試劑盒人堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物質(zhì)粒菌化試劑盒20次
HumaerminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit人末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原鈣粘蛋白β4抗體
RNA結(jié)合蛋白9抗體
ACPP重組小鼠 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 Protein
半乳糖凝集素4(GAL4)重組蛋白 Recombinant Galectin 4 (GAL4)
AK4重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 Protein
FLRT1 Protein Human 重組人 FLRT1 蛋白
IFNGR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白
AMH/MIS Muellerian抑制因子抗原 1mgAMH/MIS Muellerian抑制因子抗原
FLRT1 Protein Human 重組人 FLRT1 蛋白
LY9重組小鼠 LY9 / CD229 / SLAMF3 蛋白 Protein
HEPACAM2 Protein Rat 重組大鼠 HepaCAM2 蛋白
ANGPTL4重組人 ANGPTL4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
人腎臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠斯鈣素1(STC1)試劑盒 ,英文名: STC1 ELISA Kit
Mouse deoxypyridinoline / deoxypyridinoline (DPD) ELISA Kit 小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)試劑盒
ratNoradrenaline,NAELISAKit 大鼠去甲(NA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHIF-1Alpha(Mousehypoxia-induciblefactor1Alpha)ELISAKit小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α
細(xì)胞RSK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKit26SPSM大鼠26S蛋白酶體
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