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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

人外周血單個(gè)核細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

人外周血單個(gè)核細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:KIAA0427蛋白抗體 新朊蛋白抗體(C端) 環(huán)指蛋白192抗體 人胃癌組織成纖維細(xì)胞 人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞 SNU-1076人頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞 NCI-H23 (人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)

產(chǎn)品型號(hào):

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問(wèn)量:100

更新時(shí)間:2024-10-30

產(chǎn)品特性Product characteristics

人外周血單個(gè)核細(xì)胞

人外周血單個(gè)核細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

外周血

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

圓形

YS-01X7487

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

人外周血單個(gè)核分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)即外周血中具有單個(gè)核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。目前,主要的分離方法是密度梯度離心法,因?yàn)檠褐懈饔行纬煞值谋戎卮嬖诓町?,因此得以分離出不同的細(xì)胞。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血單個(gè)核采用取外周血、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血單個(gè)核經(jīng)過(guò)檢測(cè),且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 半貼半懸浮

細(xì)胞形態(tài) 圓形

傳代特性 不增殖;不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

人外周血單個(gè)核細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

人外周血單個(gè)核細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠免疫細(xì)胞表面抗原分子CD8+   英文名稱:   Mouse Cluster of Differeiation 8+   規(guī)格:      英文縮寫:   CD8+

小鼠免疫細(xì)胞表面抗原分子8   英文名稱:   Mouse Cluster Of Differeiation 8   規(guī)格:      英文縮寫:   CD8+

小鼠1型膠原   英文名稱:   Mouse Collagen Type 1   規(guī)格:      英文縮寫:   C1

小鼠3型膠原   英文名稱:   Mouse Collagen Type 3   規(guī)格:      英文縮寫:   C3

小鼠去甲(NE)試劑盒 96T/48T

Human urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 人型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒

Humanmammaliaargetofrapamyein,mTORELISAKit 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

GuineaPigmonocytechemotacticprotein4,MCP-4試劑盒豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒規(guī)格:96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞可溶性總蛋白制備試劑盒20

MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒規(guī)格:96T/48T

轉(zhuǎn)錄因子7類似物2重組兔單克隆抗體

白細(xì)胞分化抗原CD207抗體

CD200重組食蟹猴 CD200 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a 0.5mgMAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 髓鞘相關(guān)糖蛋白(抗原)

FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標(biāo)簽) Protein

CRIP2 Protein Human 重組人 CRIP2 蛋白

CAMK4 Protein Mouse 重組小鼠 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a 0.5mgMAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 髓鞘相關(guān)糖蛋白(抗原)

CRIP2 Protein Human 重組人 CRIP2 蛋白

CD200重組食蟹猴 CD200 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CAMK4 Protein Mouse 重組小鼠 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標(biāo)簽) Protein

人外周血單個(gè)核細(xì)胞大鼠神經(jīng)元衍生孤兒受體1(NOR1)試劑盒 ,英文名: NOR1 ELISA Kit

Mouse surface membrane immunoglobulin (SmIg) ELISA Kit 小鼠細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)試劑盒

Ratacetylcholine,ACHELISAKit 大鼠乙酰(Ach)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHBsAb(Humanai-hepatitisBvirussurfaceaibody)ELISAKit人抗乙型肝病毒表面抗體

細(xì)胞艾滋病毒1蛋白酶(HIV-1PROTEASE)活性熒光淬滅法定量試劑盒20

SheepIerleukin1β,IL-1βELISAKit綿羊白介素1β(IL-1β)試劑盒規(guī)格:96T/48T

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。


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