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更新時間:2024-10-30
人外周血樹突狀細胞(DC細胞)
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
外周血 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 樹突狀 | YS-01X7542 |
細胞簡介:
人外周血DC分離自外周血,由外周血單核細胞誘導而成的;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。DC細胞,全稱樹突狀細胞(DC),是近年來倍受們關注的專職抗原呈遞細胞(APC),能攝取、加工及呈遞抗原,啟動T細胞介導的免疫反應。由美國學者Steinman于1973年在淋巴結中發(fā)現(xiàn),從脾臟中分離出一類與粒細胞、巨噬細胞和淋巴細胞形態(tài)和功都不同的白細胞,因其細胞膜向外伸出,形成與神經細胞軸突相似的膜性樹狀突起,故而命名為樹突狀細胞。未成熟DC具有較強的遷移能力,成熟DC能有效激活初始型T細胞,處于啟動、調控、并維持免疫應答的中心環(huán)節(jié)。
方法簡介:
公司實驗室分離的人外周血DC采用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人外周血樹突狀細胞(DC細胞)經CD86免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細胞形態(tài) 樹突狀
傳代特性 屬于高度分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
豚鼠端粒酶試劑盒 豚鼠端粒酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠端粒酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豚鼠端粒酶試劑盒、豚鼠端粒酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豚鼠單核細胞趨化蛋白4試劑盒 豚鼠單核細胞趨化蛋白4試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠單核細胞趨化蛋白4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豚鼠單核細胞趨化蛋白4試劑盒、豚鼠單核細胞趨化蛋白4eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豚鼠促卵泡素試劑盒 豚鼠促卵泡素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠促卵泡素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豚鼠促卵泡素試劑盒、豚鼠促卵泡素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豚鼠表皮生長因子試劑盒 豚鼠表皮生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠表皮生長因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豚鼠表皮生長因子試劑盒、豚鼠表皮生長因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA 試劑盒
Human glycated albumin (GA) ELISA Kit 人糖化白蛋白(GA)試劑盒
HumanHomocysteicacid,HcyELISAKit 人同型半胱(Hcy)試劑盒 進口分裝
HumanBence-Jonesprotein,BJP試劑盒人本周蛋白(BJP)試劑盒
植物種子活性葉綠體分離試劑盒20次
Humaarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit人抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)試劑盒
自然殺傷凝集素樣受體G2抗體
表皮生長因子受體III型突變體抗體
CA9重組小鼠 Carbonic Anhydrase IX / Car9 蛋白 (His 標簽) Protein
ATF1 (Activating Transcription Factor1 0.5mgATF1 (Activating Transcription Factor1) 活化復制因子1
CCL24重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 標簽) Protein
FLT1 Protein Human 重組人 VEGFR1 / FLT-1 蛋白 (His 標簽)
CD302 Protein Rat 重組大鼠 CD302 / CLEC13A 蛋白
ATF1 (Activating Transcription Factor1 0.5mgATF1 (Activating Transcription Factor1) 活化復制因子1
FLT1 Protein Human 重組人 VEGFR1 / FLT-1 蛋白 (His 標簽)
CA9重組小鼠 Carbonic Anhydrase IX / Car9 蛋白 (His 標簽) Protein
CD302 Protein Rat 重組大鼠 CD302 / CLEC13A 蛋白
CCL24重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 標簽) Protein
人外周血樹突狀細胞(DC細胞)大鼠神經纖維網蛋白1(P1)試劑盒 ,英文名: P1 ELISA Kit
Mouse cyclin D3 (Cyclin-D3) ELISA Kit 小鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)試劑盒
Rat25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISAKit 大鼠25羥D3(25(OH)D3/25HVD3)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHBeAg(立可讀)乙型肝e抗原
細胞半胱(cysteine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
Reatserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit大鼠絲/蘇蛋酸酶(STK)試劑盒
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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