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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

人直腸黏膜上皮細(xì)胞

產(chǎn)品簡介:

人直腸黏膜上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:KLRA1(Ly-49a)抗體 成纖維細(xì)胞生長因子17抗體 非霍奇金淋巴瘤蛋白抗體 人子宮肌瘤組織源細(xì)胞 人食管成纖維細(xì)胞 PL-21人急性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞 MDA-MB-468 (人乳腺癌細(xì)胞)

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:118

更新時間:2024-10-31

產(chǎn)品特性Product characteristics

人直腸黏膜上皮細(xì)胞

人直腸黏膜上皮細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

直腸組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

上皮細(xì)胞樣

YS-01X7164

細(xì)胞簡介:

人直腸黏膜上皮分離自直腸組織;直腸為大腸的未段,位于小骨盆內(nèi)。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結(jié)腸,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿過盆膈,下端以而終。直腸上端的大小似結(jié)腸,其下端擴(kuò)大成直腸壺腹,是糞便排出前的暫存部位,最下端變細(xì)接。直腸在盆腔內(nèi)的位置與骶椎腹面關(guān)系密切,與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶,位于膀胱和生殖器官的背側(cè)。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈,來自髂內(nèi)動脈的直腸中動脈和來自髂內(nèi)動脈的直腸下動脈。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機(jī)體面對病原微生物的道防線。因此,腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞,在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度。

方法簡介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人直腸黏膜上皮采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人直腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

人直腸黏膜上皮細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

人直腸黏膜上皮細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠核因子κB抑制蛋白α(IKB-α)試劑盒   96T/48T

小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)試劑盒      試劑盒   組裝/原裝

小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)試劑盒   96T/48T

小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒   96T/48T

小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 人輕化1(HYD)試劑盒

Humancarbohydrate-deficieansferrin,CDTELISAKit 人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanalpha-L-fucosidase,AFU試劑盒人αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物二(MDA)比色法定量試劑盒50

MonkeyMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISAKit巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)試劑盒規(guī)格:96T/48T

DNA拓普西異構(gòu)酶ⅡA抗體

高遷移率族蛋白2樣蛋白1抗體

ESAM重組小鼠 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 Protein

補(bǔ)體1抑制因子(C1INH)重組蛋白 Recombinant Complement 1 Inhibitor (C1INH)

DCTPP1重組人 XTP3TPA / DCTPP1 蛋白 Protein

DMP1 Protein Human 重組人 DMP1 蛋白

PDGFRB Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 PDGFRB / PDGFR-1 蛋白

補(bǔ)體1抑制因子(C1INH)重組蛋白 Recombinant Complement 1 Inhibitor (C1INH)

DMP1 Protein Human 重組人 DMP1 蛋白

ESAM重組小鼠 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 Protein

PDGFRB Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 PDGFRB / PDGFR-1 蛋白

DCTPP1重組人 XTP3TPA / DCTPP1 蛋白 Protein

人直腸黏膜上皮細(xì)胞大鼠脯酰羧肽酶(PRCP)試劑盒 ,英文名: PRCP ELISA Kit

Mouse niic oxide (NO) ELISA Kit 小鼠血清(NO)試劑盒

Ratalpha-L-fucosidase,AFUELISAKit 大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGPI(Humanglucose-6-phosphateisomerase)ELISAKit人葡萄糖60酸異構(gòu)酶

細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)(DNA合成抑制)試劑盒20

Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。


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