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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:106
更新時間:2024-10-31
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:人主動脈平滑肌細胞
組織來源:主動脈組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
人主動脈平滑肌分離自主動脈組織;主動脈是體循環(huán)的動脈主干。其運行路徑為:升主動脈起于左心室,至右側(cè)第2胸肋關(guān)節(jié)高度移行為主動脈弓,弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈;在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈,以上為胸主動脈,至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈;髂總動脈在骶髂關(guān)節(jié)高度分為髂內(nèi)、外動脈。主動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。主動脈平滑肌細胞在心血管疾病發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用,以主動脈平滑肌細胞為實驗研究對象,探討心血管疾病相關(guān)發(fā)病機制是目前研究的熱點;體外培養(yǎng)的主動脈平滑肌細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
公司實驗室分離的人主動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人主動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠敏感蛋白-1 英文名稱: thrombospondin 1 規(guī)格: 英文縮寫: TSP-1
小鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白 英文名稱: thrombomodulin 規(guī)格: 英文縮寫: TM
小鼠TH糖蛋白 英文名稱: Mouse Tamm Horsfall Protein 規(guī)格: 英文縮寫: THP
小鼠抗酸性0酸酶5 英文名稱: Mouse Tarate Resista Acid Phosphatase 5 規(guī)格: 英文縮寫: AP 5
小鼠乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒 96T/48T
Human visfatin / visfatin (visfatin) ELISA Kit 人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)試劑盒
HumanSurfactaProteinD,SP-DELISAKit 人表面活性蛋白D(SP-D)試劑盒 96T/48T 進口分裝
guineapighepatocytegrowthfactor,HGF試劑盒豚鼠肝細胞生長因子(HGF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量試劑盒20次
MouseCeruloplasmin,CP/CERELISAKit小鼠銅藍蛋白(CP/CER)試劑盒規(guī)格:96T/48T
eIF3β蛋白抗體
過氧化酶1
TGFBR2重組食蟹猴 TGFBR2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A 0.5mgMICA(MHC class I polypeptide-related sequence A) 一種細胞應激分子抗原
CDH17重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白 Protein
COX5B Protein Human 重組人 COX5B 蛋白
CD3D Protein Mouse 重組小鼠 CD3d / CD3 delta 蛋白 (Fc 標簽)
MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A 0.5mgMICA(MHC class I polypeptide-related sequence A) 一種細胞應激分子抗原
COX5B Protein Human 重組人 COX5B 蛋白
TGFBR2重組食蟹猴 TGFBR2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CD3D Protein Mouse 重組小鼠 CD3d / CD3 delta 蛋白 (Fc 標簽)
CDH17重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白 Protein
人主動脈平滑肌細胞大鼠配對框基因6(PAX6)試劑盒 ,英文名: PAX6 ELISA Kit
Mouse thromboxane B2 (TXB2) ELISA Kit 小鼠血栓素B2(TXB2)試劑盒
RatGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit 大鼠γ氨基(GABA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGP210(MouseAi-glucoprotein210)ELISAKit小鼠抗核膜糖蛋白210抗體
細胞丁酰酯酶活性化學發(fā)光法定量試劑盒20次
RatThyroid-Peroxidase,TPOELISAKit大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)試劑盒規(guī)格:96T/48T
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