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更新時間:2024-10-31
兔海馬神經(jīng)元細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
腦海馬體 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細(xì)胞樣 | YS-01X7772 |
細(xì)胞簡介:
兔海馬神經(jīng)元分離自海馬體;海馬體(Hippocampus),又名海馬回、海馬區(qū)、大腦海馬,海馬體主要負(fù)責(zé)記憶和學(xué)習(xí)。海馬神經(jīng)元細(xì)胞是海馬區(qū)的主要細(xì)胞組成,主要功能是參與近期記憶、情緒及內(nèi)臟功能調(diào)節(jié)、是老年性癡呆、癲癇等疾病的主要病灶之一。海馬屬于大腦的邊緣系統(tǒng),在學(xué)習(xí)、記憶、情緒反應(yīng)及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理生理變化等方面有重要作用,而且海馬組織是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)主要的神經(jīng)干細(xì)胞聚集區(qū),具有高度序化板層結(jié)構(gòu)和神經(jīng)元相對獨(dú)立分布的特點(diǎn),境界相對清晰,便于取材,因此,海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)模型被廣大基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)研究者當(dāng)做理想的實(shí)驗?zāi)P?。海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)是研究神經(jīng)細(xì)胞生物學(xué)特性和外源干擾因素作用(細(xì)胞因子)的有效細(xì)胞模型,其在神經(jīng)生物學(xué),發(fā)育生物學(xué)體外實(shí)驗研究中已被廣泛應(yīng)用。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
方法簡介:
實(shí)驗室分離的兔海馬神經(jīng)元采用消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗室分離的兔海馬神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin-Ⅲ免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性:屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液:0.125%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠鐵蛋白(FE)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠酶2(CA-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human tetanus aibody (Tetanus Ab) ELISA Kit 人破傷風(fēng)抗體(Tetanus Ab)試劑盒
Humanfattyacid-bindingprotein,FABPELISAKit 人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAcetylcholinesterase,AChE試劑盒人乙酰酯酶(AChE)試劑盒規(guī)格:96T/48T
正常人體腎組織S9組分(5毫克/毫升)500微升
Mouseai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISAKit小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
PALM3抗體
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白90B抗體
PDCD1重組小鼠 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein
Cecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽 0.5mgCecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽)
KYNU重組人 KYNU / Kynureninase 蛋白 Protein
CTSD Protein Human 重組人 Cathepsin D / CTSD 蛋白
CD226 Protein Mouse 重組小鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
Cecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽 0.5mgCecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽)
CTSD Protein Human 重組人 Cathepsin D / CTSD 蛋白
PDCD1重組小鼠 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein
CD226 Protein Mouse 重組小鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
KYNU重組人 KYNU / Kynureninase 蛋白 Protein
兔海馬神經(jīng)元細(xì)胞大鼠硫氧還蛋白還原酶1(xR1)試劑盒 ,英文名: xR1 ELISA Kit
Mouse proinsulin (PI) ELISA Kit 小鼠胰島素原(PI)試劑盒
RatSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 大鼠超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGDH/GLDH(HumanGlamatedehydrogenase)ELISAKit人谷脫氫酶
細(xì)胞元素?zé)晒舛吭噭┖?span>20次
RatsecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit大鼠分泌型0脂酶A2(sPLA2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
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