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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
小鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
小鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：黑色素瘤相關(guān)抗原C3抗體 鋅指蛋白AN1抗體 STPG4蛋白抗體 小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 大鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞 KYSE-520人食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞 A-431 (人表皮癌細(xì)胞)
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：103
更新時(shí)間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腸組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 球形 | YS-01X7637 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠腸神經(jīng)嵴干分離腸組織；神經(jīng)嵴干細(xì)胞（neural crest stem cells，NCSC），即外周神經(jīng)系統(tǒng)干細(xì)胞，起源于胚胎期的神經(jīng)管背側(cè)，與中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細(xì)胞在形態(tài)學(xué)上有著顯著不同，NCSC可表達(dá)低親和力神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體p75NTR而不能分化出少突膠質(zhì)細(xì)胞，而中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細(xì)胞與之恰好相反。NCSC可在不同部位分化出多種組織，如神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)、黑色素細(xì)胞、內(nèi)分泌細(xì)胞、平滑肌、骨骼肌及骨等，其中可特異性分化出腸神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)的NCSC，被稱為腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞（gut neural crest stem cells，GNCSC）。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸神經(jīng)嵴干采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸神經(jīng)嵴干經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 球形
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豬免疫球蛋白G(IgG)ELISAKit ELISA.
豬免疫球蛋白E(IgE)ELISAKit ELISA.
豬可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISAKit ELISA.
豬巨噬細(xì)胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISAKit ELISA.
豬(Coisol)ELISA 試劑盒
Human parathyroid hormone related protein (PTHrP) ELISA Kit 人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)試劑盒
guineapigImmunoglobulinE,IgEELISAKit 豚鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforANA(Humanai-nucleolusaibody)ELISAKit人抗核仁抗體
血液谷草酰乙酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活性光譜法定量試劑盒20次
PorcineCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒
MAP激酶激活死亡域蛋白4C抗體
細(xì)胞色素P450 2J2抗體
CD52重組大鼠 CD52 / CDW52 蛋白 Protein
GFP 綠色熒光蛋白 0.5mgGFP 綠色熒光蛋白
UNG重組人 Uracil-DNA glycosylase / UNG 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
ASGR2 Protein Human 重組人 ASGR2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
DLL1 Protein Mouse 重組小鼠 DLL1 / Delta-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GFP 綠色熒光蛋白 0.5mgGFP 綠色熒光蛋白
ASGR2 Protein Human 重組人 ASGR2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CD52重組大鼠 CD52 / CDW52 蛋白 Protein
DLL1 Protein Mouse 重組小鼠 DLL1 / Delta-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
UNG重組人 Uracil-DNA glycosylase / UNG 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞大鼠核轉(zhuǎn)錄因子κBP65(NFκBp65)試劑盒 ，英文名： NFκBp65 ELISA Kit
Rabbit prothrombin fragme F1+2 (F1+2) ELISA Kit 兔原片段F1+2(F1+2)試劑盒
漢坦病毒Ⅱ型(HTV-Ⅱ)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMousecholinephosphoglyceride,PC/CPGELISAKit小鼠0酸甘油酯
體液肌酐(CREATININE)化學(xué)比色法定量試劑盒20次
ELISAKit15-LO/LOX人15脂加氧酶
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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