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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
小鼠睪丸支持細(xì)胞
產(chǎn)品簡介：
小鼠睪丸支持細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：有絲分裂著絲粒相關(guān)驅(qū)動蛋白抗體 宿主細(xì)胞因子Zhangfei抗體 TIGAR蛋白抗體 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 大鼠牙髓干細(xì)胞 Hs 839.T人黑色素瘤細(xì)胞 HELA 人子宮頸癌細(xì)胞
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：110
更新時間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠睪丸支持細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
睪丸組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7405 |
細(xì)胞簡介：
小鼠睪丸支持分離自睪丸；睪丸支持細(xì)胞又稱Sertoli細(xì)胞，在體內(nèi)呈不規(guī)則的高錐體形，細(xì)胞基部附著在基膜上，頂部伸至曲精小管腔面。它是生精細(xì)胞的支架，為其提供必需的營養(yǎng)物質(zhì)，能合成與分泌雄激素結(jié)合蛋白，為其提供高濃度的雄激素環(huán)境等，還具有構(gòu)成血-睪屏障，形成睪丸內(nèi)微環(huán)境，調(diào)節(jié)發(fā)生等功能。睪丸支持細(xì)胞是睪丸的主要組成細(xì)胞，能分泌多種生長因子和免疫抑制因子，不僅可為提供營養(yǎng)支持和免疫保護，也能對其他細(xì)胞，如胰島和神經(jīng)細(xì)胞提供營養(yǎng)支持，而且當(dāng)其與胰島或神經(jīng)細(xì)胞共移植時，也能夠為這些細(xì)胞提供免疫保護，提高植活率。因此，睪丸支持細(xì)胞在細(xì)胞移植中具有廣泛的應(yīng)用前景。制備高活率的Sertoli不僅對Sertoli的基礎(chǔ)研究有重要價值，而且在發(fā)生等領(lǐng)域有重要意義。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠睪丸支持采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠睪丸支持經(jīng)Fas-L免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白 -4(IGFBP-4) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
免疫球蛋白 IgA(IgA) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
免疫球蛋白 IgE(IgE) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
免疫球蛋白 IgG(IgG) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
鴨脂肪甘油三酯酯酶(ATGL)試劑盒
Human ai Punje cell aibodies / ai Yo aibody (PCA-1/Yo) ELISA Kit 人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)試劑盒
HumaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISAKit 人核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforACTHELISAKit魚促腎上腺皮質(zhì)激素
血液組織纖維型蛋白溶酶原激活劑(tPA)活性熒光定量試劑盒20次
MousePlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISAKit小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)試劑盒
WD重復(fù)蛋白16抗體
氧化低密度脂蛋白單克隆抗體
IGFBP6重組小鼠 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ABCG1 peptide 三0酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗原 0.5mgABCG1 peptide 三0酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗原
MMP19重組人 RASI-1 / MMP19 蛋白 Protein
CALML5 Protein Human 重組人 CALML5 / CLSP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
TNFRSF17 Protein Rat 重組大鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白
ABCG1 peptide 三0酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗原 0.5mgABCG1 peptide 三0酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗原
CALML5 Protein Human 重組人 CALML5 / CLSP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
IGFBP6重組小鼠 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
TNFRSF17 Protein Rat 重組大鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白
MMP19重組人 RASI-1 / MMP19 蛋白 Protein
小鼠睪丸支持細(xì)胞大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)試劑盒 ，英文名： Casp-3 ELISA Kit
Rabbit collagen type I (Col I) ELISA Kit 兔子Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)試劑盒
(229E/NL63)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMMP-3ELISAkit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)琥珀酰明膠法比色定量試劑盒20次
ELISAKienin犬腎素
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進行
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