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更新時間:2024-11-04
小鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
骨骼肌組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7614 |
細胞簡介:
小鼠骨骼肌衛(wèi)星分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方。肌細胞內(nèi)有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段,叫做一個肌節(jié)。肌衛(wèi)星細胞指骨骼肌中除骨骼肌纖維(肌細胞)外的一種扁平、有突起的細胞。著于肌纖維(肌細胞)表面;當(dāng)肌纖維(肌細胞)受損后,肌衛(wèi)星細胞可增殖分化,參與肌纖維(肌細胞)的修復(fù),因此具有干細胞性質(zhì)。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠骨骼肌衛(wèi)星采用-膠原酶混合消化法結(jié)合多次差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠骨骼肌衛(wèi)星經(jīng)Desmin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、馬血清、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳1-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒 96T/48T
小鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)試劑盒 96T/48T
小鼠神經(jīng)生長因子(NGF)試劑盒 96T/48T
小鼠神經(jīng)生長導(dǎo)向因子(Slit2)試劑盒 96T/48T
小鼠雙酪酸(dityrosine)試劑盒 96T/48T
Rat maix metalloproteinase 13 (MMP-13) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)試劑盒
HumanAprotinin,APELISAKit 人(AP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
DuckIerleukin-4,IL-4試劑盒鴨白介素4(IL-4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
藻類菌脂質(zhì)綠色熒光染色試劑盒20次
MouseCytochrome-C,Cyt-CELISAKit小鼠(Cyt-C)試劑盒規(guī)格:96T/48T
β1,4-N乙酰半乳糖氨基轉(zhuǎn)移酶1抗體
胰腺特異轉(zhuǎn)錄因子PTF1A抗體
NA重組甲型流感 H1N1 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (N295S mutation) (高活性) Protein
phospho-AR/androgen receptor( p-Ser580 0.5mgphospho-AR/androgen receptor( p-Ser580)peptide 雄激素受體(多肽)
CSNK1G1重組人 CSNK1G1 / CKI-gamma 1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CLEC7A Protein Human 重組人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 蛋白
CPA2 Protein Human 重組人 Carboxypeptidase A2 / CPA2 蛋白
phospho-AR/androgen receptor( p-Ser580 0.5mgphospho-AR/androgen receptor( p-Ser580)peptide 雄激素受體(多肽)
CLEC7A Protein Human 重組人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 蛋白
NA重組甲型流感 H1N1 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (N295S mutation) (高活性) Protein
CPA2 Protein Human 重組人 Carboxypeptidase A2 / CPA2 蛋白
CSNK1G1重組人 CSNK1G1 / CKI-gamma 1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞大鼠關(guān)聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)試劑盒 ,英文名: PAPPA ELISA Kit
Mouse vascular endothelial cell growth factor (VEGF) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)試劑盒
RatAquaporin0,AQP-0ELISAKit 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGzms-AELISAKit大鼠顆粒酶A
細胞長鏈烯脂酰水合酶(ENOYLCOAHYDRATASE)活性比色法定量試劑盒20次
RatUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
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