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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:109
更新時間:2024-11-04
小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
骨髓 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7108 |
細(xì)胞簡介:
小鼠骨髓基質(zhì)分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)細(xì)胞是一類具有多向分化潛能的干細(xì)胞,其中部分細(xì)胞有自我復(fù)制、高度增殖和多向分化能力,在特定培養(yǎng)條件下可向骨、軟骨、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、心肌、骨胳肌、脂肪細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等間葉組織細(xì)胞轉(zhuǎn)化。骨髓基質(zhì)細(xì)胞在自然條件下主要分化為成骨細(xì)胞,在不同的培養(yǎng)條件下其分化途徑不同,其在成骨細(xì)胞與成脂細(xì)胞分化之間呈反向變化。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠骨髓基質(zhì)采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠骨髓基質(zhì)經(jīng)CD29、CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠細(xì)胞色素P450(mouse Cytochrome P450) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠C反應(yīng)蛋白(mouse CRP) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠CXC趨化因子受體3(mouse CXCR3) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠CXC趨化因子配體16(mouse CXCL16) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠(VE)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat CrossLaps ELISA Kit (Cr) 大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)試劑盒
Humansorbitoldehydrogenase,SDHELISAKit 人脫輕酶(SDH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenIerleukin6,IL-6試劑盒雞白介素6(IL-6)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞IL蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mouseglucocoicoidreceptor,GRELISAKit小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)試劑盒規(guī)格:96T/48T
白介素22受體結(jié)合蛋白抗體
有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體
TNFRSF19重組小鼠 TNFRSF19 / TROY 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
CD19(B-lymphocyte antigen CD19 0.5mgCD19(B-lymphocyte antigen CD19) CD19
TXNDC17重組人 TXNDC17 / TRP14 / TXNL5 蛋白 Protein
CDK7 & CCNH & MNAT1 Protein Human 重組人 CDK7 & CCNH & MNAT1 Heterotrimer 蛋白
SELP Protein Rat 重組大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白
CD19(B-lymphocyte antigen CD19 0.5mgCD19(B-lymphocyte antigen CD19) CD19
CDK7 & CCNH & MNAT1 Protein Human 重組人 CDK7 & CCNH & MNAT1 Heterotrimer 蛋白
TNFRSF19重組小鼠 TNFRSF19 / TROY 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
SELP Protein Rat 重組大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白
TXNDC17重組人 TXNDC17 / TRP14 / TXNL5 蛋白 Protein
小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞大鼠骨形成蛋白6(BMP6)試劑盒 ,英文名: BMP6 ELISA Kit
People aminoterminal propeptide of type III procollagen (P III ) ELISA Kit 人Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)試劑盒
RatAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforEMAIgA(Humanai-EndomysialAibodyIgA)ELISAKit人抗肌內(nèi)膜抗體IgA
細(xì)胞內(nèi)核酸氧化8-羥基鳥苷(8-OHG流式細(xì)胞分析試劑盒10次
RatIerleukin8,IL-8ELISAKit大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行
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