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更新時間:2024-11-04
小鼠海馬神經元細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦海馬體 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 神經元細胞樣 | YS-01X7347 |
細胞簡介:
小鼠海馬神經元分離自海馬體;海馬體(Hippocampus),又名海馬回、海馬區(qū)、大腦海馬,海馬體主要負責記憶和學習。海馬神經元細胞是海馬區(qū)的主要細胞組成,主要功能是參與近期記憶、情緒及內臟功能調節(jié)、是老年性癡呆、癲癇等疾病的主要病灶之一。海馬屬于大腦的邊緣系統(tǒng),在學習、記憶、情緒反應及神經系統(tǒng)疾病的病理生理變化等方面有重要作用,而且海馬組織是中樞神經系統(tǒng)內主要的神經干細胞聚集區(qū),具有高度序化板層結構和神經元相對獨立分布的特點,境界相對清晰,便于取材,因此,海馬神經元體外培養(yǎng)模型被廣大基礎醫(yī)學和臨床醫(yī)學研究者當做理想的實驗模型。海馬神經元細胞培養(yǎng)是研究神經細胞生物學特性和外源干擾因素作用(細胞因子)的有效細胞模型,其在神經生物學,發(fā)育生物學體外實驗研究中已被廣泛應用。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠海馬神經元采用消化法、神經元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結合化學試劑抑制法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠海馬神經元經β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 神經元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
小鼠血管緊張素原(aGT)試劑盒 96T/48T
小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒 96T/48T
小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒 96T/48T
小鼠血管活性腸肽(VIP)試劑盒 96T/48T
小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat osteoprotegerin (OPG) ELISA Kit 大鼠骨保護素(OPG)試劑盒
Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISAKit 人多巴胺-β羥化酶(DBH)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenHeatShockProtein20,HSP-20試劑盒雞熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞CASPASE-9蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
1號染色體開放閱讀框54抗體
智力發(fā)育調節(jié)相關蛋白BRWD3抗體
CNDP1重組小鼠 CNDP1 蛋白 Protein
玻連蛋白(VTN)重組蛋白 Recombinant Vitronectin (VTN)
PPCDC重組人 PPC-DC / PPCDC 蛋白 Protein
CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白
RBP4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 RBP4 蛋白
Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原 0.5mgAggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原
CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白
REG3D重組小鼠 REG3D 蛋白 Protein
IFNA4 Protein Rat 重組大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽)
C7重組人 C7 / Complement component 7 蛋白 Protein
小鼠海馬神經元細胞大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒 ,英文名: BMP-4 ELISA Kit
Pig aminoterminal propeptide of type III procollagen (P III ) ELISA Kit 豬Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)試劑盒
2型脊髓灰質病毒(PV-2)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMIS/AMH)ELISAKit大鼠繆勒管抑制物質/抗繆勒管激素
體液離子(K)濃度化學比色法定量試劑盒20次
ELISAKitE犬雌激素
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