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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞

產(chǎn)品簡介:

小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:平滑肌細(xì)胞相關(guān)蛋白4抗體 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白GBAS抗體 電壓依賴性鈣通道蛋白抗體 小鼠卵巢上皮細(xì)胞 大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 C1498 小鼠急性骨髓性白血病細(xì)胞 RPMI8226人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞

產(chǎn)品型號(hào):

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:89

更新時(shí)間:2024-11-04

產(chǎn)品特性Product characteristics

小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞

小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

結(jié)腸組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7177

細(xì)胞簡介:

小鼠結(jié)腸平滑肌分離自結(jié)腸組織;結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分,大部分固定于腹后壁,結(jié)腸的排列酷似英文字母“M",將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為:黏膜(上皮層、固有層、黏膜肌層),黏膜下層(疏松結(jié)締組織),肌層(內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑肌),外膜(纖維膜或漿膜)。結(jié)腸平滑肌細(xì)胞主要分布于黏膜肌層和肌層的內(nèi)環(huán)形、外縱行平滑??;結(jié)腸運(yùn)動(dòng)少而緩慢,對(duì)刺激的反應(yīng)也較遲緩。結(jié)腸平滑肌在食物消化與吸收、腸道運(yùn)動(dòng)和物質(zhì)分泌、誘發(fā)全身炎癥反應(yīng)以及細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑等研究中起著重要的作用。結(jié)腸平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。結(jié)腸平滑肌運(yùn)動(dòng)活性受到神經(jīng)遞質(zhì)、胃腸激素和藥物等因素的調(diào)節(jié)。隨著現(xiàn)代胃腸動(dòng)力學(xué)研究的進(jìn)展,對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)的研究已從器官、組織水平發(fā)展到細(xì)胞、分子水平,要求在胃腸道單個(gè)平滑肌細(xì)胞標(biāo)本上來完成各種電生理、藥理和分子生物學(xué)等實(shí)驗(yàn)。體外培養(yǎng)細(xì)胞,由于影響因素單一,是研究細(xì)胞功能以及相應(yīng)的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的基礎(chǔ)。

方法簡介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠結(jié)腸平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠結(jié)腸平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

抑癌蛋白DKK3   英文名稱:   Dikkopf 3   規(guī)格:      英文縮寫:   DKK3

脫氫血栓素B2   英文名稱:   Human 11 dehydro Thromboxane B211   規(guī)格:      英文縮寫:   11-DH-TXB2

2,30酸甘油酸   英文名稱:   Human 2,3 Diphosphoglycerate   規(guī)格:      英文縮寫:   2,3-DPG

D二聚體   英文名稱:   Human D. Dimer   規(guī)格:      英文縮寫:   D.D

魚補(bǔ)體3(C3)試劑盒

Human aidiuretic hormone / vasopressin / arginine vasopressin (ADH/VP/AVP) ELISA Kit 人抗利尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒

HumanVitaminA,VAELISAKit A(VA)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforADH/VP/AVP(Mouseaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin)ELISAKit小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精加壓素

血液乙酰酯酶活性熒光法定量試劑盒20

Mousereducedglathione,GSHELISAKit小鼠還原型(GSH)試劑盒

BHLHE41單克隆抗體

19號(hào)染色體開放閱讀框71抗體

GLIPR1重組小鼠 GLIPR1 / RTVP1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP10)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 10 (MMP10)

S100A4重組人 S100A4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CA3 Protein Human 重組人 Carbonic Anhydrase III / CA3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

GFRA1 Protein Canine 重組狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP10)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 10 (MMP10)

CA3 Protein Human 重組人 Carbonic Anhydrase III / CA3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

GLIPR1重組小鼠 GLIPR1 / RTVP1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

GFRA1 Protein Canine 重組狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

S100A4重組人 S100A4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞大鼠高密度脂蛋白3(HDL3)試劑盒 ,英文名: HDL3 ELISA Kit

Rabbit esadiol (E2) ELISA Kit 兔子雌二醇(E2)試劑盒

C組輪狀病毒(HRV-C)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMHCELISAKit魚類主要組織相容性復(fù)合體

體液尿酸含量酶偶聯(lián)比色法定量試劑盒20

ELISAKitCS牛檸檬酸合成酶

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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