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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
小鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品簡介：
小鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：有絲分裂驅(qū)動蛋白樣1重組兔單克隆抗體 鋅指蛋白350/乳腺癌易感基因1結(jié)合蛋白抗體 甲狀腺受體相關(guān)蛋白220抗體 小鼠膀胱移行上皮細(xì)胞 大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 RBL-2H3大鼠嗜堿細(xì)胞白血病細(xì)胞 A549+RFP 人肺癌細(xì)胞+RFP
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：100
更新時間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
腦靜脈組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X7338 |
細(xì)胞簡介：
小鼠腦靜脈血管內(nèi)皮分離自腦靜脈組織；與腦動脈相比，腦靜脈管壁較薄。與身體其他部位的靜脈不同，腦靜脈管壁中沒有靜脈瓣，靜脈血的回流依賴高位的勢能。腦靜脈血的回流路徑可以歸納為：大部腦靜脈血經(jīng)腦深部靜脈和腦血竇流入頸內(nèi)靜脈醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理；小部腦靜脈血經(jīng)眼部翼狀靜脈叢，進(jìn)入靜脈導(dǎo)血管再到頭皮，最后流入椎管中的椎旁靜脈系統(tǒng)。腦靜脈系統(tǒng)有大量交通枝靜脈叢，即使兩側(cè)頸內(nèi)靜脈都被阻塞，大腦靜脈血仍可經(jīng)椎靜脈和頸外靜脈系統(tǒng)完成其回流。腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的主要功能是維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡，合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)參與免疫反應(yīng)，維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腦靜脈血管內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腦靜脈血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
乳糖 100g
D-Lactosemonohydrate 500g
二硫赤鮮醇 5g
DL-DTE
豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)試劑盒 ，英文名： OVA sIgE ELISA Kit
Eighth factor related aigen (F VIII Ag) ELISA Kit 人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)試劑盒
MonkeyTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 猴壞死因子α(TNF-α)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBGP/Gehrelin(Humanbrain-gpeptides)Elisakit人腦腸肽
細(xì)菌葡萄糖酵解酚紅瓊脂平板50個
RabbitLactoferrin,LTF/LFELISAKit兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)試劑盒規(guī)格：96T/48T
FITC標(biāo)記人CD71單克隆抗體
A型流感病毒（H9N2）血凝素HA1抗體
LDLR重組人 LDLR / LDL Receptor 蛋白 Protein
血管生成素樣蛋白6(ANGPTL6)重組蛋白 Recombinant Angiopoietin Like Protein 6 (ANGPTL6)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
IL18RAP Protein Human 重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
GP140 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC)
血管生成素樣蛋白6(ANGPTL6)重組蛋白 Recombinant Angiopoietin Like Protein 6 (ANGPTL6)
IL18RAP Protein Human 重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
LDLR重組人 LDLR / LDL Receptor 蛋白 Protein
GP140 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
小鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠肝X受體β(LXRβ)試劑盒 ，英文名： LXRβ ELISA Kit
Iestinal efoil factor (ITF) ELISA Kit 豬腸三葉因子(ITF)試劑盒
人博卡病毒(HBoV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMCV(Humanai-matedciullinatedvimeinaibody)ELISAKit人抗突變型瓜波形蛋白抗體
體液人體腺病毒(adenovirus)定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKitβOHB牛β
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行
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