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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

大鼠乳腺上皮細胞

產(chǎn)品簡介:

大鼠乳腺上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品:Fas相互作用蛋白激酶3抗體 ERF3B蛋白抗體 核苷酸結(jié)合蛋白2抗體 大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞 小鼠膀胱移行上皮細胞 EJ人膀胱癌細胞 CRT (人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞)

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:102

更新時間:2024-10-29

產(chǎn)品特性Product characteristics

大鼠乳腺上皮細胞

大鼠乳腺上皮細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

乳腺組織

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

上皮細胞樣

YS-01X7087

細胞簡介:

大鼠乳腺上皮分離自乳腺組織;乳腺是復(fù)管泡狀皮膚腺,主要由腺上皮細胞組成,并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期,導(dǎo)管末梢發(fā)育成腺泡;近年來的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發(fā)生都與乳腺上皮細胞(MEC)有密切聯(lián)系,體外分離培養(yǎng)MECs即成為研究開展的關(guān)鍵步驟。乳腺是乳房的腺體組織,乳腺由導(dǎo)管和腺泡組成,腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常發(fā)育是由體內(nèi)激素和局部合成的生長因子共同調(diào)控,其中乳腺表達的生長因子對乳腺上皮細胞的增殖、分化、凋亡產(chǎn)生極大的影響。乳腺上皮分離自分娩后3-5天的乳腺組織,為貼壁生長型細胞,呈多角形、圓形以及短梭形;乳腺上皮細胞主要功能即生乳功能。

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介:

公司實驗室分離的大鼠乳腺上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的大鼠乳腺上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠乳腺上皮細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠乳腺上皮細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

溶酶體相關(guān)膜蛋白3   英文名稱:   Human Lysosomal Associated membrane protein 3   規(guī)格:      英文縮寫:   LAMP3

人乳酸脫氫酶   英文名稱:   Human Lactate Dehydrogenase   規(guī)格:      英文縮寫:   LDH

   英文名稱:   lysozyme   規(guī)格:      英文縮寫:   LZM/LYS

甘露聚糖結(jié)合凝集素絲酸肽酶-2   英文名稱:   mannan-binding lectin associated serine proteases   規(guī)格:      英文縮寫:   MASP-2

豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)試劑盒 ,英文名: CGRP ELISA Kit

Human factor related apoptosis (FAS/CD95) ELISA Kit 人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)試劑盒

MonkeyMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISAKit巨噬細胞移動抑制因子(MIF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforbFGF-9(Humanbasicfibroblastgrowthfactor9)ELISAKit人堿性成纖維細胞生長因子9

細菌同還原酶(aldo-ketoreductase)總活性比色法定量檢測試劑20

rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit兔子白介素6(IL-6)試劑盒規(guī)格:96T/48T

TATA盒結(jié)合蛋白相關(guān)因子TAF1C抗體

磷酸化內(nèi)收蛋白gamma抗體

TNFSF12重組食蟹猴 / TNFSF12 蛋白 (Fc 標簽) Protein

MAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原 0.5mgMAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原)

TPH1重組人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein

IL1R2 Protein Human 重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白

MERTK Protein Mouse 重組小鼠 MERTK / Mer 蛋白 (His & GST 標簽)

MAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原 0.5mgMAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原)

IL1R2 Protein Human 重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白

TNFSF12重組食蟹猴 / TNFSF12 蛋白 (Fc 標簽) Protein

MERTK Protein Mouse 重組小鼠 MERTK / Mer 蛋白 (His & GST 標簽)

TPH1重組人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein

大鼠乳腺上皮細胞兔子白介素1(IL-1)ELISA 試劑盒

Human von Willebrand factor / ristocetin cofactor (VWF) ELISA Kit 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)試劑盒

HumanBlockingaibody,BAELISAKit 人封閉抗體(BA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humaneyemuscleaibody,EMAb試劑盒人抗眼肌抗體(EMAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織TIE2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

humanoncostatinMreceptor,OSMRELISAKit人制瘤素M受體(OSMR)試劑盒規(guī)格:96T/48T


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