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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

大鼠軟骨細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

大鼠軟骨細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:組蛋白轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白1抗體 磷酸化丁酸鹽反應(yīng)因子1抗體 核仁磷酸蛋白2抗體 大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞 小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞 HEB人腦膠質(zhì)細(xì)胞株;HEB人腦膠質(zhì)細(xì)胞株 BC-022 (人乳腺癌細(xì)胞)

產(chǎn)品型號(hào):

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:103

更新時(shí)間:2024-10-29

產(chǎn)品特性Product characteristics

大鼠軟骨細(xì)胞

大鼠軟骨細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

軟骨組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

梭形、多角形

YS-01X7305

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

大鼠軟骨分離自軟骨組織;軟骨組織由軟骨細(xì)胞、基質(zhì)及纖維構(gòu)成。軟骨組織再生能力強(qiáng),這些增生的幼稚細(xì)胞形似纖維母細(xì)胞,以后逐漸變?yōu)檐浌悄讣?xì)胞,并形成軟骨基質(zhì),細(xì)胞被埋在軟骨陷窩內(nèi)而變?yōu)殪o止的軟骨細(xì)胞。根據(jù)軟骨組織內(nèi)所含纖維成分的不同,可將軟骨分為透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種,其中以透明軟骨的分布較廣,結(jié)構(gòu)也較典型。軟骨細(xì)胞(chondrocyte)位于軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的軟骨細(xì)胞位于軟骨組織的表層,單個(gè)分布,體積較小,呈橢圓形,長(zhǎng)軸與軟骨表面平行,越向深層的軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形,細(xì)胞核圓形或卵圓形,染色淺,細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于軟骨陷窩內(nèi),這些軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成,稱為同源細(xì)胞群。電鏡下,軟骨細(xì)胞有突起和皺褶,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠軟骨采用膠原酶-聯(lián)合消化制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每3-4天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠軟骨細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

 ?、?消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠軟骨細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠氧化型(GSSG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠還原型(GSH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠c-fosELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat calcineurin (CaN) ELISA Kit 大鼠鈣調(diào)0酸酶(CaN)試劑盒

HumanUreaplasmaurealyticumaibody,UU-AbELISAKit 人解脲脲原體抗體(UU-Ab)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Bovineacetone試劑盒牛同檢測(cè)(acetone)試劑盒規(guī)格:96T/48T

A含量熒光定量試劑盒20

MouseInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISAKit小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T

Toll樣受體9抗體

磷酸化神經(jīng)色羥化酶2抗體

FCGR3重組小鼠 CD16 / FCGR3 蛋白 Protein

Akt/PKC(Protein Kinase C,PKC 0.5mgAkt/PKC(Protein Kinase C,PKC) 蛋白激酶C(多肽抗原)

CD1B重組人 CD1B / CD1A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD46 Protein Human 重組人 CD46 蛋白

CD79B Protein Rat 重組大鼠 CD79B / B29 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白J(SPJ)重組蛋白 Recombinant Surfactant Associated Protein J (SPJ)

CD46 Protein Human 重組人 CD46 蛋白

IgG3重組小鼠 IgG3-Fc 蛋白 Protein

EDAR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 EDAR 蛋白

CARHSP1重組人 CARHSP1 蛋白 Protein

大鼠軟骨細(xì)胞兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA 試劑盒

Plasma alpha granule membrane protein (GMP-140) ELISA Kit 人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒

Humansteroidcellaoaibody,SCAELISAKit 人抗類固醇細(xì)胞抗體(SCA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanFcregionofimmunoglobulinG,Fcγ試劑盒GFc片段(Fcγ)試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織WEE1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

humannuclearfactorofkappalightpolypeptidegeneenhancerinB-cellsinhibitorepsilon,NfkbieB細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(Nfkbie)試劑盒規(guī)格:96T/48T


原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。


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