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產(chǎn)品型號(hào):
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時(shí)間:2024-10-30
人顱蓋造骨細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
顱骨組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7320 |
細(xì)胞簡介:
人顱蓋造骨分離自顱骨組織;造骨細(xì)胞(osteoblast)亦稱成骨細(xì)胞。是參與骨組織形成的細(xì)胞。顱骨位于脊柱上方,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成。除下頜骨及舌骨外,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié),起著保護(hù)和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部,內(nèi)有顱腔,容納腦,共8塊。面顱為顱的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等結(jié)構(gòu),構(gòu)成面部的支架,共15塊。成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞,負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化。骨不斷地進(jìn)行著重建,骨重建過程包括破骨細(xì)胞貼附在舊骨區(qū)域,分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì),分泌蛋白酶消化骨基質(zhì),形成骨吸收陷窩;其后,成骨細(xì)胞移行至被吸收部位,分泌骨基質(zhì),骨基質(zhì)礦化而形成新骨;破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵。成骨細(xì)胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機(jī)制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ),也是藥物篩選、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人顱蓋造骨采用膠原酶消化法制備而來制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人顱蓋造骨經(jīng)ALP染色檢測,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體試劑盒 小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體試劑盒、小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白試劑盒 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白試劑盒、小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠血小板衍生生長因子試劑盒 小鼠血小板衍生生長因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠血小板衍生生長因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠血小板衍生生長因子試劑盒、小鼠血小板衍生生長因子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠胰島素樣生長因子試劑盒 小鼠胰島素樣生長因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠胰島素樣生長因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠胰島素樣生長因子試劑盒、小鼠胰島素樣生長因子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)試劑盒 96T/48T
Rat calcium binding protein (CR) ELISA Kit 大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)試劑盒
Humanai-myelinaibodyIgAELISAKit 人抗髓0脂抗體IgA(ai-myelinAb)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CamelBeta-Endorphin,β-EP試劑盒β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
魚類組織元素?zé)晒舛吭噭┖?span>20次
Mouseinsulinaoaibodies,IAAELISAKit小鼠胰島素自身抗體(IAA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
絲組合因子4抗體
ATP酶2C2抗體
PDCD1重組人 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein
尾加壓素2(UST2)重組蛋白 Recombinant Urotensin 2 (UST2)
RAET1E重組人 RAET1E / ULBP4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CD55 Protein Human 重組人 CD55 / DAF 蛋白
HA Protein H1N3 重組甲型流感 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
尾加壓素2(UST2)重組蛋白 Recombinant Urotensin 2 (UST2)
CD55 Protein Human 重組人 CD55 / DAF 蛋白
PDCD1重組人 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein
HA Protein H1N3 重組甲型流感 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
RAET1E重組人 RAET1E / ULBP4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
人顱蓋造骨細(xì)胞大鼠線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)試劑盒 ,英文名: UCP1 ELISA Kit
Pla vitamin E (VE) ELISA Kit 植物(VE)試劑盒
MouseImmunoglobulinE,IgEELISAKit 小鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit人血漿α顆粒膜蛋白
細(xì)胞HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitSOD大鼠超氧化物歧化酶
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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