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更新時(shí)間:2024-10-30
人卵巢癌組織源細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
卵巢癌組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7440 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人卵巢癌組織源分離自患有卵巢癌病人的卵巢癌組織;卵巢癌是卵巢腫瘤的一種惡性腫瘤,是指生長(zhǎng)在卵巢上的惡性腫瘤,其中90%~95%為卵巢原發(fā)性的癌,另外5%~10%為其它部位原發(fā)的癌轉(zhuǎn)移到卵巢。由于卵巢癌早期缺少癥狀,即使有癥狀也不特異,篩查的作用又有限,因此早期診斷比較困難,就診時(shí)60%~70%已為晚期,而晚期病例又療效不佳。因此,雖然卵巢癌的發(fā)病率低于宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌居?jì)D科惡性腫瘤的第三位,但死亡率卻超過(guò)宮頸癌及子宮內(nèi)膜癌之和,高居?jì)D科癌癥,是嚴(yán)重威脅婦女健康的最大疾患。卵巢由于組織學(xué)的特點(diǎn),其癌的組織學(xué)類型之多居全身各器官。卵巢腫瘤主要的組織學(xué)類型如下:來(lái)源于卵巢的生發(fā)上皮,具體類型包括漿液性瘤、粘液性瘤、子宮內(nèi)膜樣瘤、透明細(xì)胞瘤、 纖維上皮瘤(又稱勃勒納瘤)、混合型上皮瘤等。來(lái)源于卵巢的生殖細(xì)胞。主要類型有畸胎瘤、無(wú)性細(xì)胞瘤、胚胎性癌、內(nèi)胚竇瘤、絨毛膜癌、混合性生殖細(xì)胞瘤。來(lái)源于卵巢的特異性性索間質(zhì),包括顆粒細(xì)胞瘤、卵泡膜細(xì)胞瘤、纖維瘤、卵巢睪九母細(xì)胞瘤、兩性母細(xì)胞瘤等。來(lái)源于原發(fā)在其它器官的惡性腫瘤,常見的包括消化道和婦科其它器官。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢癌組織源經(jīng)檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒 96T/48T
小鼠血小板因子3(PF-3)試劑盒 96T/48T
小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)試劑盒 96T/48T
小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)試劑盒 96T/48T
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human leishimaria aibody (Leishimaria Ab) ELISA Kit 人利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)試劑盒
HumanAi-Saccharomycescerevisiaeaibody,ASCAELISAKit 人抗釀酒酵母抗體(ASCA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
C4試劑盒鮭魚補(bǔ)體蛋白4規(guī)格:96T/48T
魚類組織元素比色法定量試劑盒20次
MouseInsulieceptorβ,ISR-βELISAKit小鼠胰島素受體β(ISR-β)試劑盒規(guī)格:96T/48T
絲裂原活化蛋白激酶相關(guān)蛋白1抗體
A型鉀離子通道調(diào)節(jié)蛋白4抗體
NTRK3重組人 TrkC / NTRK3 蛋白 Protein
性別決定區(qū)Y框蛋白2(SOX2)重組蛋白 Recombinant Sex Determining Region Y Box Protein 2 (SOX2)
ICAM5重組人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽) Protein
CD5 Protein Human 重組人 CD5 蛋白
Spike Protein SARS 重組SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, Fc 標(biāo)簽)
性別決定區(qū)Y框蛋白2(SOX2)重組蛋白 Recombinant Sex Determining Region Y Box Protein 2 (SOX2)
CD5 Protein Human 重組人 CD5 蛋白
NTRK3重組人 TrkC / NTRK3 蛋白 Protein
Spike Protein SARS 重組SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, Fc 標(biāo)簽)
ICAM5重組人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽) Protein
人卵巢癌組織源細(xì)胞大鼠線粒體甘油-3-0酸?;D(zhuǎn)移酶(GPAM)試劑盒 ,英文名: GPAM ELISA Kit
Pla vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 植物K1(VK1)試劑盒
MouseImmunoglobulin,IgAELISAKit 小鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanAlphaLactalbumin,Alpha-LaELISAKit人α乳清蛋白
細(xì)胞HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKiths-CRP大鼠超敏C反應(yīng)蛋白
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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